เทคนิคการแยกแบคทีเรียในวัฒนธรรมผสม

นักจุลชีววิทยา นักพันธุศาสตร์ และนักชีววิทยาระดับโมเลกุลใช้วัฒนธรรมแบคทีเรียเพื่อค้นหาความลับของชีวิต นักจุลชีววิทยาศึกษาแบคทีเรียเพื่อค้นหายาปฏิชีวนะชนิดใหม่ในการรักษาโรคติดเชื้อ นักพันธุศาสตร์ใช้แบคทีเรียเพื่อตรวจสอบว่าสารเคมีมีคุณสมบัติในการก่อมะเร็งหรือไม่ นักชีววิทยาระดับโมเลกุลศึกษาวิถีทางชีวเคมีของกระบวนการในเซลล์เพื่อทำความเข้าใจหน้าที่ของเอนไซม์ที่เรามีเหมือนกันกับแบคทีเรีย วิทยาศาสตร์ทั้งสามแยกวัฒนธรรมของแบคทีเรียโดยใช้เทคนิคเดียวกันไม่ว่าจะต่างกันไปตามการศึกษาก็ตาม: การโรยด้วยจานวุ้น (agar plate streaking)

•••Chad Baker / รูปภาพ Photodisc / GettyGetty

จุลินทรีย์เป็นสิ่งมีชีวิตเซลล์เดียว เช่น แบคทีเรียและเชื้อรา สิ่งมีชีวิตเหล่านี้สืบพันธุ์ได้อย่างรวดเร็วและเติบโตง่าย ทำให้มีประโยชน์อย่างยิ่งต่อการศึกษา เมื่อมีการค้นพบจุลินทรีย์ชนิดใหม่ที่อาจเกิดขึ้นในธรรมชาติ ตัวอย่างจะถูกวางลงในสื่อการเจริญเติบโตที่เรียกว่า "น้ำซุป" น้ำซุป ประกอบด้วยน้ำฆ่าเชื้อ เกลือ น้ำตาล และสารอาหารอื่นๆ ที่จะส่งเสริมการเจริญเติบโตของแบคทีเรียอย่างรวดเร็วในขวดระหว่าง fla การฟักตัว อย่างไรก็ตาม บ่อยครั้ง น้ำซุปจะมีแบคทีเรียมากกว่าหนึ่งชนิด ในการแยกแบคทีเรียเพียงตัวเดียว นักวิทยาศาสตร์จะกระจายตัวอย่างน้ำซุปขนาดเล็กบนจานวุ้นกึ่งแข็งโดยใช้เทคนิคจุลินทรีย์ที่เรียกว่า "streaking"

•••รูปภาพ Comstock / Comstock / Getty

จานวุ้นเป็นเจลกึ่งโปร่งใสกึ่งแข็งซึ่งประกอบด้วยสาหร่ายและสารอาหารที่มีความเข้มข้นจำเพาะ ประโยชน์ของวุ้นอยู่ที่ความจริงที่ว่ามันให้พื้นผิวที่นุ่มนวลสำหรับการเจริญเติบโตของแบคทีเรีย เมื่อนักวิทยาศาสตร์ใส่แบคทีเรียเพียงตัวเดียวลงบนวุ้น มันจะขยายพันธุ์โดยเพิ่มจำนวนตัวเองเป็นสองเท่าเป็นพันๆ ครั้ง และจะปรากฏเป็นอาณานิคมเล็กๆ ของเซลล์เดี่ยว

•••Photos.com/Photos.com/Getty Images

การฆ่าเชื้อแบคทีเรียต้องใช้เครื่องมือ 3 อย่าง ได้แก่ จานวุ้น เตาแอลกอฮอล์ และห่วงลวด จานวุ้นเป็นตัวกลางการเจริญเติบโตซึ่งแบคทีเรียจะถูกถ่ายโอนหลังจากเติบโตในน้ำซุป เตาแอลกอฮอล์เป็นโคมไฟขนาดเล็กที่เติมแอลกอฮอล์สำหรับฆ่าเชื้อห่วงลวด ซึ่งเป็นด้ามยาวเรียวพร้อมห่วงลวดทนไฟขนาดเล็กติดอยู่ที่ปลายด้านหนึ่ง ห่วงจะเก็บน้ำซุปที่เต็มไปด้วยแบคทีเรียไว้เล็กน้อยเมื่อถ่ายโอนแบคทีเรียจากน้ำซุปไปยังจานวุ้น

•••Hemera Technologies/Photos.com/Getty Images

แบคทีเรียที่แพร่ระบาดไปทั่วจานวุ้นทำได้ง่าย แต่คุณต้องทำตามขั้นตอนนี้ให้ถูกต้อง มิฉะนั้น คุณจะไม่แยกโคโลนีแยกจากกัน อุ่นห่วงบนเตาแอลกอฮอล์เพื่อฆ่าเชื้อลวด จากนั้นจุ่มปลายห่วงลงในน้ำซุป ขูดปลายห่วงไปมาหลาย ๆ ครั้งในหนึ่งในสี่ของจานวุ้น ฆ่าเชื้อลูปอีกครั้ง และคืบข้ามและตั้งฉากกับริ้วแรก ย้ายลูปไปมาสองสามครั้งบนส่วนใหม่ของเพลต ฆ่าเชื้อปลาย วนเบา ๆ ข้ามส่วนที่ลายสุดท้ายหนึ่งครั้ง และเลื่อนวนไปมาหลาย ๆ ครั้ง ริ้วจะเจือจางน้ำซุปหยดแรกจนถึงจุดที่เส้นสุดท้ายจะมีอาณานิคมเดียว วางจานในตู้ฟักหรือบนโต๊ะที่อุณหภูมิห้อง และรอให้อาณานิคมเติบโตในชั่วข้ามคืน โคโลนีเดี่ยวในสตรีคสุดท้ายจะกลายเป็นโคโลนีที่แยกจากกันของแบคทีเรียเพียงตัวเดียว