เอ็นไซม์เป็นโมเลกุลโปรตีนที่มีรูปร่างเฉพาะ ซึ่งช่วยให้พวกมันเร่งปฏิกิริยาทางชีวเคมีภายในร่างกาย ดังนั้นจึงทำหน้าที่เป็นตัวเร่งปฏิกิริยา อัตราการทำงานของเอ็นไซม์ขึ้นอยู่กับตัวแปรสำคัญหลายประการ ซึ่งรวมถึงอุณหภูมิ ค่า pH และความเข้มข้น
กิจกรรมของเอนไซม์มีความสัมพันธ์ที่ดีกับอุณหภูมิ เมื่ออุณหภูมิเพิ่มขึ้น กิจกรรมของเอนไซม์ก็เพิ่มขึ้นเช่นกัน เนื่องจากมีจำนวนการชนกันระหว่างโมเลกุลที่ทำปฏิกิริยากับเอนไซม์เพิ่มขึ้น การเพิ่มอุณหภูมิต่อไปจะทำให้การทำงานของเอนไซม์สูงขึ้น สำหรับเอนไซม์ของมนุษย์ อุณหภูมิสูงสุดนี้อยู่ที่ประมาณ 98.6 องศาฟาเรนไฮต์ ซึ่งเป็นอุณหภูมิร่างกายของเรา อุณหภูมิที่เพิ่มขึ้นต่อไปจะทำให้การทำงานของเอนไซม์ลดลง นี่เป็นเพราะการเสียสภาพของโปรตีนเอนไซม์ซึ่งเป็นการทำลายพันธะโมเลกุลภายในโปรตีน เมื่อพันธะเหล่านั้นแตกสลาย รูปร่างของเอ็นไซม์จะเปลี่ยนไปและไม่สามารถทำหน้าที่เป็นตัวเร่งปฏิกิริยาได้อีกต่อไป
การวัดความเป็นกรดหรือด่างของสารละลายเรียกว่า pH เอนไซม์มีวิวัฒนาการให้ทำงานที่ค่า pH จำเพาะ และการเบี่ยงเบนไปจากค่านี้จะทำให้การทำงานของเอนไซม์ลดลง เนื่องจากค่า pH ที่สูงหรือต่ำสามารถทำให้เอนไซม์เสื่อมสภาพได้เช่นเดียวกับที่อุณหภูมิสูง ของเหลวในร่างกายของเราส่วนใหญ่มีค่า pH เป็นกลางประมาณ 7.2 ดังนั้น เอนไซม์ของมนุษย์จึงมีกิจกรรมสูงสุดที่ pH นี้
สารตั้งต้นคือโมเลกุลที่เอนไซม์ทำงาน เนื่องจากเอ็นไซม์สามารถจับกับซับสเตรตได้ครั้งละหนึ่งตัวเท่านั้น กิจกรรมของพวกมันจึงขึ้นอยู่กับความเข้มข้นของซับสเตรต การเพิ่มความเข้มข้นของสารตั้งต้นในขั้นต้นจะทำให้การทำงานของเอนไซม์เพิ่มขึ้น เนื่องจากหมายความว่าสารตั้งต้นและเอนไซม์สามารถจับคู่กันได้มากขึ้น การเพิ่มความเข้มข้นของซับสเตรตเพิ่มเติมมักจะไม่เพิ่มกิจกรรมเนื่องจากเอ็นไซม์อิ่มตัวด้วยซับสเตรต กล่าวอีกนัยหนึ่ง มีเส้นที่สารตั้งต้นต้องรอก่อนถึงเอนไซม์
กิจกรรมของเอนไซม์ยังขึ้นอยู่กับความเข้มข้นของโมเลกุลด้วย ด้วยความเข้มข้นของซับสเตรตที่มีความเข้มข้นสูงตามอำเภอใจที่ pH และอุณหภูมิคงที่ ความเข้มข้นของเอนไซม์ที่เพิ่มขึ้นจะทำให้กิจกรรมเพิ่มขึ้น สิ่งนี้นำไปสู่ความสัมพันธ์เชิงเส้นซึ่งกิจกรรมของเอนไซม์เป็นสัดส่วนโดยตรงกับความเข้มข้นของเอนไซม์