Hur man mäter hämningszonen

Bakterie är några av de vanligaste organismerna på jorden. Forskare uppskattar att det är över en biljon olika arter bakterier, som uppgår till över fem miljoner biljoner biljoner (ja, det är två separata biljoner) individer på planeten.

Av alla dessa bakterier, dock mindre än 1 procent orsaka sjukdom hos människor. Dessa sjukdomar kan sträcka sig från magbesvär, eftersom du kan få från en mild infektion, till allvarliga och dödliga sjukdomar som bubonisk pest (orsakad av Yersinia pestis bakterier) som dödade 50 miljoner människor på 1300-talet.

Det är därför upptäckten av antibiotika, som är mediciner som eliminerar bakterier, har räddat så många liv. Problemet med bakterier är att de anpassar sig och utvecklas mycket snabbt, vilket leder till att antibiotikaresistenta bakteriestammar blir allt vanligare. Mäta hämningszon för en bakteriestam kan berätta för forskare och läkare om den är resistent mot ett antibiotikum.

Antibiotika är läkemedel som dödar bakterier. De arbetar genom att rikta in sig och resultera i att bakterieceller dör samtidigt som de lämnar dina mänskliga celler ensamma. Varje antibiotikum fungerar på ett något annorlunda sätt genom att rikta in sig på bakteriespecifika strukturer och signalera för att eliminera dem.

Till exempel stör penicillin (en av de mest kända antibiotika) bakteriecellväggarna, vilket leder till att de inte fungerar ordentligt och därmed dör. Läkemedel som fungerar så kallas beta-laktamantibiotika.

Makrolidantibiotika rikta bakteriella ribosomer. Detta förhindrar bakterier från att syntetisera proteiner, vilket innebär att bakterierna inte kan överleva. Ett vanligt exempel är erytromycin, ett antibiotikum som används för att behandla en mängd olika infektioner inklusive bronkit och ett antal hudinfektioner.

Kinolonantibiotika är en annan vanlig typ av antibiotika som fungerar genom att störa bakteriellt DNA.

Efter den första upptäckten av antibiotika på 1920-talet insåg forskare snabbt att det var bakterier utvecklas för att vara resistent mot medicinerna. Många forskare försökte sedan skapa metoder som gjorde det möjligt för dem att testa hur mottagliga bakteriestammar var för antibiotika för att förstå vad de hade att göra med, så att säga.

De första testerna involverade seriella utspädningar av bakteriell buljong spridda på plattor med varierande koncentrationer av antibiotika för att bestämma känsligheten. Denna metod tog dock lång tid.

Det är där den Kirby-Bauer-test kommer in. Denna metod standardiserades av mikrobiologer W. M. M. Kirby och A. W. Bauer. Deras test tar ren bakteriekultur och strimlar på en agarplatta. Därefter placeras en liten skiva infunderad med antibiotika (lämpligen kallad en antibiotikaskiva) på agarplattan. Olika skivor med olika antibiotika placeras runt plattan och bakterierna får ruva under en viss tid.

När skivan har placerats på plattan börjar antibiotika diffundera ut. Om bakterierna som studeras är känsliga för antibiotikumet, kommer inga bakterier att växa nära skivan eftersom de kommer att dödas av medicinen.

Men när du rör dig längre bort från antibiotikaskivan kommer antibiotikakoncentrationen att minska. På ett visst avstånd från skivan börjar du se bakterietillväxt igen eftersom antibiotikakoncentrationen är för låg för att påverka bakterierna.

Området runt antibiotikaskivan som inte har någon bakterietillväxt kallas hämningszonen. Inhiberingszonen är en enhetligt cirkulär zon utan bakterietillväxt runt antibiotikaskivan. Ju större denna zon är, desto mer känslig är bakterien för det antibiotikumet. Ju mindre zonen är, desto mer resistent (och därmed mindre känslig) är bakterierna.

Förutom att namnge denna praxis och protokoll skapade forskare Kirby och Bauer också standardiserade diagram som använde diametern på hämningszonen för att bestämma bakteriens känslighet eller resistens mot bakterie.

Dessa diagram finns här och använda bakteriearten, den typ av antibiotikum som används och zonen för inhiberingsdiameter till avgöra om bakterierna är resistenta, mellanliggande känsliga eller mottagliga för det antibiotikum.

Notera: Du mäter alltid hämningszonen i termer av millimeter.

För att mäta hämningszonen, placera först plattan på en icke-reflekterande yta. Ta en linjal eller tjocklek som mäter i millimeter och placera "0" i mitten av antibiotikaskivan. Mät från mitten av skivan till kanten av området utan tillväxt. Ta din mätning i millimeter.

Detta mäter radie av hämningszonen. Multiplicera det med två för att få diametern.

Du kan också mäta direkt över hämningszonen från kant till kant som korsar genom mitten av antibiotikaskivan för att direkt mäta diametern istället för att mäta radien.