Näringsagar är en typ av allmänt komplext medium som huvudsakligen används för odling av en mängd olika mikroorganismer.
Komplexa medier mikrobiologi talar, är tillväxtmedier som består av en rad tillgängliga näringsämnen och proteinmolekyler i okända koncentrationer. Näringsagar används för odling av icke-snabba mikrober som bakterier och jäst.
Vad växer på näringsagar?
Mikroorganismer behöver mat, vatten och en lämplig miljö för att överleva och växa. Näringsagar tillhandahåller dessa resurser för många typer av mikrober, från svampar som jäst och mögel till vanliga bakterier som Streptokock och Stafylokock.
Mikroberna som kan odlas på komplexa medier såsom näringsagar kan beskrivas som icke-fasta organismer. Icke-fasta organismer är mikrober som kan växa och trivas utan speciella närings- eller miljöförhållanden.
Vissa bakterier kan inte odlas med näringsmedium. Snabba organismer (kräsen bakterier) kan behöva en mycket specifik matkälla som inte finns i näringsagar. Ett exempel på en krånglig organism är
Treponema pallidum, bakterier som orsakar syfilis. Forskare har utan framgång försökt odla denna bakterie i en kultur i över 100 år.Näringsagar kan användas för att odla mikroorganismer för flera ändamål. En användning är odling och underhåll av specifika kolonier av icke-fasta organismer för vetenskaplig studie eller identifiering. En annan användning är att upptäcka och kvantifiera förekomsten av potentiellt skadliga bakterie eller andra mikrober i vatten, avlopp, skaldjur, kött, mejeriprodukter och andra livsmedelsprodukter.
Mediet måste hållas sterilt för att säkerställa att de enda mikrober som växer är de som är avsedda för odling och inte växer till följd av kontaminering av mediet.
Ingredienser för näringsagar
Den huvudsakliga ingredienser i näringsagar är pepton, biffextrakt och agar. Dessa ingredienser pulveriseras och tillsätts sedan till destillerat vatten. Den specifika sammansättningen av näringsämnen agar kan variera något beroende på tillverkaren och källan till ingredienserna som används.
Sammansättningen av det beredda näringsmedelsagarmediet är 0,5 procent pepton, 0,3 procent biffextrakt (eller jästextrakt), 1,5 procent agar och 0,5 procent natriumklorid.
Att definiera agar
För att definiera agar, tänk på en komplex kolhydrat som kommer från marina röda alger som fungerar som ett stelningsmedel i näringsmediet. Det har inget näringsvärde för mikroberna att odlas.
Agargeler vid en temperatur på 113 grader Fahrenheit (45 grader Celsius) och smälter vid 203 grader Fahrenheit (95 grader Celsius). Agar inkluderar också livsmedelssorter som kan användas som en förtjockningsingrediens för soppor, gelé och andra livsmedel.
Definition av pepton
De definition av pepton är ett lösligt protein som bildas i de tidiga stadierna av proteinnedbrytning under matsmältningsprocessen. Den tillverkas genom att delvis smälta proteinmaterial som kött, gelatin och kasein med syror eller enzymer.
Syftet med pepton i det näringsrika agarmediet är att tillhandahålla den primära källan av organiskt kväve för den växande mikrobiella kulturen, och det kan också vara en källa till kolhydrater och vitaminer. Den exakta sammansättningen av pepton i näringsmediet kommer att skilja sig beroende på proteinkällan och matsmältningsmetoden.
Nötkött extrakt
De extrakt av nötkött används för att göra näringsmedlet agar är en blandning av vattenlösliga partiklar av djurvävnad, kolhydrater, organiska kväveföreningar, vitaminer och salt.
Jästextrakt kan också användas för att tillverka näringsagar och ger liknande föreningar. Syftet med föreningarna i biffextrakt är att hjälpa tillväxten av de bakterier som odlas på näringsmediet.
Destillerat vatten
Destillerat vatten används vanligtvis för att tillverka näringsmedlets agar. Destillerat vatten är vatten som har bearbetats för att avlägsna eventuella upplösta föroreningar och mineraler.
Det destillerade vattnet i näringsmedium är nödvändigt för livsprocesserna för de mikroorganismer som växer där, precis som vatten är viktigt för livsprocesserna för alla levande saker. Tillsatsen av natriumklorid till blandningen gör att odlingsmiljön liknar cytoplasma.
Förbereda näringsmedelsmediet
För att ordentligt förbered en näringsagarblandning för bakteriekultur är det viktigt att hänvisa till specifika instruktioner från näringstillverkaren. Vissa ingredienser eller mängder kan variera något beroende på näringsagarens källa.
- Lös upp 28 gram näringspulver i en liter destillerat vatten.
- Värm blandningen till koka och rör om hela tiden. Fortsätt att koka och rör om blandningen i ungefär en minut eller tills allt pulver är upplöst.
- Autoklaver den upplösta blandningen i 15 minuter vid 249,8 grader Fahrenheit (121 grader Celsius).
- Låt agarblandningen svalna något. Fördela i plattor eller rör. Låt stelna.
- Byt ut locken och förvara i en sval, mörk och steril miljö som kylskåpet. Lagra agarplattor (Petriskålar) upp och ner för att förhindra kondensbildning på mediet.
Det slutliga pH-värdet för det beredda agarmediet bör vara 6,8. Mediet ska ha en ljus bärnstensfärgad färg och ha konsistensen av fast gelatin. Beredd näringsagarmedium bör hålla i kylskåpet i upp till två år, såvida det inte finns en markant förändring i mediets utseende som skulle indikera kontaminering.