När du testar effekten av pH på enzymaktivitet bör du variera pH. Du kan dock göra det på bra eller dåliga sätt. Tänk på vilka extra faktorer som kan förvirra effekterna av varierande pH. I annat fall kan de erhållna resultaten inte bero på förändringen i pH, utan någon annan faktor. Att veta hur man korrekt varierar pH och vilka faktorer som förväxlar experimentets pH hjälper dig att få bra resultat och förstå varför dina resultat kanske inte är exakt vad du förväntade dig.
Ändra bara en sak
När du testar effekten av pH på enzymaktiviteten, varierar du bara pH medan du håller andra faktorer konstant. Dessa andra faktorer inkluderar enzymkoncentration, substratkoncentration och temperatur. De faktorer som förblir konstanta kallas kontrollvariablerna. Kontrollvariabler gör att du kan dra slutsatsen att resultaten på enzymaktivitet som erhållits i ditt experiment beror på att pH varierar, den oberoende variabeln. Att veta vilka faktorer som inte ska förändras i ett experiment är lika viktigt som att veta vilken faktor som ska variera, annars blir det svårt att dra slutsatsen om resultaten faktiskt beror på det som var testad.
Välj en syra eller en bas
Lösningens pH kan ändras genom att lösa upp olika mängder av en syra eller en bas i vatten. Ett sätt att testa effekten av pH på enzymaktiviteten är att gradvis tillsätta droppar av en stark syra eller en stark bas in i lösningen som innehåller enzymet och observera sedan den punkt där enzymaktiviteten saktar ner eller slutar. En syra definieras som en förening som donerar en vätejon, kallad proton (H +), och en bas definieras som en förening som donerar en hydroxidjon (-OH). Olika syror och baser har olika antal protoner eller hydroxidjoner att ge bort. Inte alla protoner eller hydroxidjoner doneras omedelbart när en syra eller bas tillsätts till en lösning, men antalet donerade protoner eller hydroxidjoner ändrar pH i olika hastigheter. Således är det en bra idé att variera pH-värdet i ett enzymexperiment med endast en typ av syra eller en typ av bas. Annars läggs andra variabler oavsiktligt till.
Vävnader ändrar också pH
Vissa laboratorieexperiment som studerar enzymaktivitet involverar slipning av ny vävnad för att frigöra enzymerna från cellerna och sedan tillsats av substrat för att mäta enzymaktivitet. Färsk vävnad innehåller blod. På grund av närvaron av enzymer i blod som förändrar koldioxidgasen som löses i blodet till kolsyra kan vävnaden i sig påverka pH. Således, i experiment som involverar enzymaktivitet i färsk vävnad, är det bra att tvätta av blodet i en bägare med kallt vatten innan vävnaden mals. Detta minimerar den oavsiktliga förändringen av pH på grund av vävnaden, så att den målmedvetna förändringen i pH kan studeras.
Håll storlekarna desamma
Som diskuterats ovan är enzymkoncentration en kontrollfaktor som inte bör varieras när man testar pH-effekten på enzymaktiviteten. Emellertid varierar experimentella förfaranden fortfarande i sig enzymkoncentrationen på subtila sätt. Om man använder en ren lösning av enzymer håller man enzymkoncentrationen konstant. I experiment där enzymet är från färsk vävnad, såsom bitar av potatis, bitar av växter eller bitar av lever, ändrar dock storleken på bitarna mängden enzym i varje provrör. Således kommer det att vara till hjälp att skära bitarna av vävnaden så jämnt som möjligt. Detta är ett annat exempel på hur man vet vad man inte ska ändra, och varför det är svårt att inte undvika förändringar helt, hjälper till att tolka resultaten av att variera en faktor som pH.