Пуферски раствори се опиру променама пХ, јер садрже слабе киселинско-базне коњугате који неутралишу Х + и ОХ- јоне. Пуферски раствори се састоје од слабих киселина или база и соли те киселине или базе. Избор одговарајућег пуферског система зависи од распона пХ за пуферовање. Већина биолошких реакција се дешава у распону пХ од 6 до 8. Фосфатни пуфер пуферује у опсегу пХ од 6,5 до 7,5. Пуфери карбоксилне киселине су корисни од пХ 3 до 6. Боратни пуфери функционишу од пХ 8,5 до 10. Пуфери аминокиселина као што су глицин и хистидин делују у различитим распонима пХ. Трис пуфер је један од најчешће коришћених пуферских система у биолошким лабораторијама. Израчуни за Трис пуферски раствор користиће се у следећем примеру, али методологија се примењује на било које пуферско решење.
Користите умножак и запремину коначног раствора за одређивање потребних молова базе. На пример, ако су потребне 2 литре 0,1 М раствора Трис пуфера, потребан број молова Триса је:
Израчунајте потребну масу пуфера множењем броја молова потребних молекулском тежином базе. На пример, маса 0,2 мола Трис базе једнака је:
Растворити базу у дестилованој води помоћу магнетне мешалице и рингле за мешање. Растворити га у количини воде само нешто мање од крајње запремине раствора (950 до 975 мл за сваки литар коначног раствора). ПХ Трис пуфера се мења са концентрацијом и треба га прилагодити ако се користи премала почетна запремина. Такође је најбоље припремити пуфер на истој температури на којој ће се користити током теста или експеримента, јер Трис има велике промене пХ вредности зависне од температуре.
Савети
- Да бисте уштедели време приликом припреме пуферског раствора, можете користити претходно припремљене пуферске концентрате при потребном пХ и разблажити за жељени моларитет и запремину. Припремите пуферски раствор на истој температури на којој ће се користити да би се избегле значајне промене пХ. Избегавајте дуготрајна подешавања пХ, титрирајте тек након разблаживања до жељене концентрације. Растварање у премалој количини ће довести до поновљених титрација.
Упозорења
- Будите опрезни приликом руковања киселинама и базама. Носите заштитне наочаре.
О аутору
Царла Боулианне је еволуциона биологиња по образовању и слободна списатељица по страсти. Поред тога што је писала за Деманд Студиос и еХов, она је сценаристкиња за Родитељство надареног детета на Суите101.цом. Одушевљена је истраживањем нових тема кроз опсежна истраживања.
Пхото Цредитс
Фотографија љубазношћу Емми П. @ моргуеФиле.цом