Pet korakov za pripravo poševnic iz agarja

Agar je žele podobna snov, pridobljena iz prečiščenih celičnih sten rdečih alg. Dodajajo ga mikrobiološkim gojiščem, ki so materiali, na katerih mikroorganizmi gojijo v laboratorijih, da bi snovi zagotovili večjo trdno strukturo. Agar nima hranilne vrednosti, zato ga znanstveniki, ko ga uporabljajo za gojenje mikroorganizmov, dodajo različna hranila, da povečajo rast bakterij v petrijevkah ali epruvetah. Ko raziskovalci shranjujejo bakterije v epruveti, se to imenuje pošev agarja, ker se tekoči rastni medij strdi, medtem ko je epruveta v nagnjenem položaju. Zgornji pokrovček na poševnici preprečuje, da bi se agar izsušil.

Medij je za poševe pripravljen drugače kot petrijevke. Sterilizacija se opravi z agarjem v epruvetah; petrijevke predhodno steriliziramo, preden vanje vlijemo steriliziran agar. Izmerite potrebno količino vode in jo dajte v erlenmajerico. Segrevajte ga na štedilniku, dokler skoraj ne zavre. Po potrebi dodajte druge sestavine in mešanico počasi in neprestano mešajte, dokler se ne raztopi. Te sestavine lahko vključujejo goveji ekstrakt, pepton in pH pufre, odvisno od vrste gojenega mikroorganizma.

instagram story viewer

Preden dodate dehidrirani agar v prahu, ga zmešajte z majhno količino hladne destilirane vode, da preprečite grudanje. Bodite previdni pri dodajanju agarja v vročo tekočino, ker se lahko peni in prelije v lonec. Naenkrat dodajte majhne količine agarja in mešajte, da se agar enakomerno porazdeli. Ko zmes začne pariti, preden zavre, ugasnite ogenj.

Nezaprte epruvete položite na stojalo za epruvete. Epruvete napolnite tako, da iz lonca s sterilno pipeto prenesete približno 5 mililitrov - približno 0,17 unče ali 1 čajno žličko - staljenega agarja. Ohlapno zaprite vsako epruveto, ker agar ne bo steriliziran, če bo tesno zaprta. Vse epruvete sterilizirajte v avtoklavu približno 25 minut pri 121 stopinjah Celzija ali 250 stopinjah Fahrenheita.

Ko je agar še vroč, stojalo, ki drži epruvete, previdno nagnite na trdno površino ali a debela knjiga, pri čemer se prepričajte, da je medij v ceveh v poševnem položaju glede na test cevi. Pustite, da se medij ohladi in strdi pod tem kotom, kar poveča površino agarja. Ko se agar ohladi, privijte pokrovčke epruvet. Poševnice so pripravljene za uporabo, ko se agar strdi. Shranite jih lahko pri sobni temperaturi ali v hladilniku za prihodnjo uporabo.

Nagnite poševnico s prenosom celic s cepilno zanko iz enokolonijskega mikroorganizma na ploščo na površino poševnice. Premaknite zanko po površini poševnice in zamašite cevi. Nagnite inkubirajte, dokler ne pride do znakov rasti, nato epruveto postavite v hladilnik.

Teachs.ru
  • Deliti
instagram viewer