Med tankoslojno kromatografijo tehnik postavi madeže kemične zmesi na ravno ploščo, prevlečeno s plastjo vpojnega materiala, nato pa spodnji del plošče postavi v topilo. Ko se topilo premika po plošči, se kemikalije v mešanici z njim premikajo z različno hitrostjo, zato se ločujejo. Ta test določi, katere kemikalije so v mešanici s primerjavo stopenj potovanja neznank z znanimi standardi. Na rezultate pa lahko vpliva veliko dejavnikov.
TL; DR (predolgo; Nisem prebral)
Na vrednosti retencijskega faktorja pri tankoslojni kromatografiji vplivajo absorbent, topilo, sama kromatografska plošča, tehnika nanašanja in temperatura topila in plošče.
Zadrževalni dejavniki
Zadrževalni faktor za kemikalijo med tankoplastno kromatografijo je merilo, kako daleč se premakne po plošči kot odziv na gibanje topila. Ker je absolutno gibanje kemikalije odvisno od tega, kako daleč potuje topilo, izračunate vrednosti faktorja zadrževanja glede na stopnjo gibanja topila. Zadrževalni faktor kemikalije je navpična razdalja, ki jo kemikalija premakne od mesta, kjer je bila prvotno nanese na ploščo, deljeno z razdaljo, ki jo prevozi topilo - merjeno od istega začetka točka.
Tankoplastna kromatografska plošča
Tankoplastna kromatografska plošča lahko vpliva na vrednost faktorja zadrževanja, dobljeno za določeno kemikalijo. Tankoplastne kromatografske plošče so lahko prevlečene z različnimi vpojnimi trdnimi snovmi; najpogosteje kremen ali aluminijev oksid. Ker retencijski faktor temelji na relativni afiniteti kemikalije do absorbenta v primerjavi s topilom, lahko sprememba absorbenta močno spremeni retencijski faktor. Tudi debelina in enakomernost plasti vpojnega sredstva se lahko razlikujeta od plošče do plošče, še posebej, če so ročno izdelane. Ti dejavniki lahko spremenijo tudi vrednost zadrževalnega faktorja za kemikalije.
Faktorji zadrževanja učinkov topil
Ker topilo nosi kemikalijo po plošči, bo tudi določeno uporabljeno topilo znatno vplivalo na vrednost zadrževalnega faktorja za kemikalijo. Topilo, ki ima močnejšo interakcijo z določeno kemikalijo, ga bo lažje premagati afiniteto kemikalije do vpojne plasti in jo v določenem obdobju premaknemo dlje čas. Mešanice topil imajo lahko tudi različne učinke, odvisno od deleža vsakega topila.
Drugi dejavniki
Obstaja še nekaj dejavnikov, ki lahko v nekaterih primerih vplivajo na faktor zadrževanja. Temperatura topila in plošče se lahko nekoliko spremeni, saj lahko na primer topilo pogosto bolje raztopi kemikalije, ki jih prevaža, pri višjih temperaturah. Tehnika nanašanja vzorca na ploščo lahko prav tako spremeni faktor zadrževanja. Če nanesete preveč vzorca, lahko nastanejo veliki razpršeni pasovi kemikalij, ki se premikajo po plošči, zaradi česar je težko natančno izmeriti razdaljo, ki jo je kemikalija prevažala.