Vedci a vedci skúmajú rast baktérií prípravou kultúr v laboratóriu. Petriho misky obsahujúce výživný agar pestujú bakteriálne kultúry jediným pohybom prsta alebo naočkovaním. Študenti si môžu pripraviť výživný agar doma pomocou zásob z potravín alebo obchodov so zdravou výživou na vedecký veľtrh. Bežné kuchynské spotrebiče a základný riad poskytujú nástroje na prípravu sterilného kultivačného média, ktoré je možné dávkovať do Petriho misiek. Dodržiavanie sterilných techník zahrievaním materiálov a udržiavaním povrchov čistých a suchých zlepší výsledky zabránením kontaminácii kultúry plesňami a časticami.
Vložte filter na kávu do sitka a sitko zaveste nad otvor priehľadnej misy.
Pomaly nalejte vývar do filtra a uistite sa, že vývar nepreteká zo strán filtra. Ak je filter upchatý časticami, vyberte použitý filter, vymeňte ho za čistý a pokračujte v nalievaní vývaru.
Vyberte sitko a filter z hornej časti misky a sledujte, či je vývar číry (tj. V kvapaline nie sú žiadne suspendované častice). Ak častice plávajú v kvapaline, opakujte kroky 1 a 2 s použitím druhej priehľadnej misky a filtra na čerstvú kávu.
Hrniec položte na sporák a do hrnca nalejte číry vývar.
Do hrnca s vývarom pridajte 16 uncí destilovanej vody.
Zapnite kachle a nastavte oheň na stredne nízky. Zahrejte vývar na dusenie (t.j. blízko boku hrnca sa objavia malé bublinky).
Pridajte 1 čajovú lyžičku agar-agarového prášku do duseného vývaru (približne 2,5 gramu) a zmes miešajte, kým sa prášok nerozpustí. Nezabudnite prášok rozmiešať, aby sa rozpustil, a zabrániť želatíne klesnúť na dno hrnca (kde môže horieť).
Opakujte krok 7, kým sa všetok prášok agaru a agaru nerozpustí v bujóne.
Pokračujte v miešaní vývaru asi 1 minútu, aby ste sa uistili, že sa všetok prášok úplne rozpustil.
Vypnite sporák, položte pokrievku na hrniec a nechajte tekutinu aspoň 15 minút vychladnúť.
Umiestnite sterilné Petriho misky do radu pre ľahkú montáž, ale neodstraňujte viečka. Ak je to žiaduce, umiestnite drobnosť, aby držala teplý hrniec. Ak namiesto Petriho misiek používate pudingové poháre s viečkom, sterilizujte pudingové poháre umiestnením pohárov a viečok. prevrátené (obrátené) na alobalom pokrytý plech cookie a pečte v rúre najmenej jednu hodinu pri 375 stupňoch Fahrenheita. Pred použitím sa uistite, že sú sterilizované poháre a viečka úplne vychladnuté.
Opatrne sa dotknite vonkajšej strany hrnca, aby ste skontrolovali, či je na dotyk teplý, a položte hrniec na drobnosť. Ak je hrniec príliš horúci na dotyk, počkajte aspoň 10 minút, kým ho nevychladne.
Odstráňte veko a odložte ho. Naberačku vložte do hrnca.
Odstráňte viečko z jednej Petriho misky a vydajte výživný vývar, aby bola misa naplnená do polovice. Misku okamžite zakryte jej krytom.
Opakujte krok 14 pre každú z Petriho misiek.
Živný vývar nechajte v Petriho miskách nerušene stuhnúť najmenej 1 hodinu.
Jemne Petriho misky potraste zo strany na stranu, aby ste skontrolovali, či výživný vývar úplne stuhol. Ak vývar nie je úplne zgelovatený, počkajte ďalších 20 minút a potom znova skontrolujte.
Stôl alebo rovný povrch zakryte zvitkom papierových uterákov, aby ste vytvorili sterilnú pracovnú plochu. Odtrhnite list papierovej utierky a štyrikrát ju preložte, aby ste vytvorili hrubý obdĺžnikový chuchvalec. Položte tento chumáč na jeden koniec pracovnej oblasti.
Premiestnite jednu Petriho misku na sterilnú pracovnú plochu a odstráňte veko. Opatrne misku otočte a jeden koniec položte na stranu zloženého chuchvalca tak, aby ležala obrátená a mierne sklonená (s miernou medzerou pri chuchvalci papierových obrúskov).
Otočte viečko a položte ho nad Petriho misku na sterilnú pracovnú plochu. Ak sa na viečku objavia kvapôčky vody, pred umiestnením na zakrytý povrch túto vlhkosť mierne pretrepte, nedotýkajte sa však vnútornej strany viečka.
Opakujte kroky 19 a 20 pre každú Petriho misku tak, že umiestnite jednu stranu obrátenej misky na stranu predchádzajúcej misky a nie chuchvačku papierových obrúskov. Misky budú pôsobiť ako rozložená súprava s medzerami na jednej strane, aby sa mohla odparovať prebytočná vlhkosť.
Pozerajte sa na obrátené Petriho misky a skontrolujte, či sa odparila vlhkosť po stranách tanierov. Po odstránení všetkej vlhkosti otočte platne pravou stranou nahor a ihneď ich zakryte viečkami.
Na misku naočkujte výživný agar tak, že pred zakrytím viečka utrite tampón obsahujúci požadovanú kultúru na povrchu výživného agaru. Petriho misku otočte tak, aby bola pevná hmota navrchu. Naočkovanú Petriho misku skladujte s pevnou časťou na vrchu na kultiváciu a vekom na dne, aby zachytila vlhkosť, voľné častice alebo rast.
Veci, ktoré budete potrebovať
- Kávové filtre
- Sitko
- 2 veľké, priehľadné misy
- 16 oz. hovädzí vývar bez tuku
- 16 oz. destilovaná voda
- Hrniec na varenie s pokrievkou
- Sporák
- 10 gramov agaru
- Odmerná lyžica
- Miešadlo
- Rolka papierových obrúskov
- Držiaky na hrnce
- Kovová naberačka
- Sterilné Petriho misky alebo číre krémové poháre s viečkami
- Voliteľné: časovač, bubon, rúra, panvica, hliníková fólia, panvica
Tipy
Ak sa na viečkach objaví nadmerná vlhkosť, vysušte a sterilizujte viečka v rúre nastavenej na 375 stupňov Fahrenheita po dobu najmenej 1 hodinu (pred vložením do krytu nezabudnite umiestniť viečka na čistú panvicu vyloženú hliníkovou fóliou rúra).
Varovania
-
Pri manipulácii s horúcim hrncom buďte opatrní, aby ste sa nepopálili. Ak je strana hrnca príliš horúca, kvapalina v hrnci je veľmi horúca. Výživný bujón by mal byť teplý, aby sa dal do riadu, ale nie príliš horúci, aby v Petriho miskách počas chladenia a tuhnutia nadmerne kondenzoval.
Nedotýkajte sa vnútra Petriho misky (t. J. Taniera alebo viečka), aby ste zabránili vniknutiu nežiaducich baktérií do kultúry.