Keď testujete vplyv pH na aktivitu enzýmu, mali by ste pH meniť. Môžete to však urobiť dobrým alebo zlým spôsobom. Pamätajte, aké ďalšie faktory môžu ovplyvňovať účinky meniaceho sa pH. Inak získané výsledky nemusia byť spôsobené zmenou pH, ale niektorým iným faktorom. Vedieť, ako správne meniť pH a aké faktory ovplyvňujú pH experimentu, vám pomôže dosiahnuť dobré výsledky a pochopiť, prečo vaše výsledky nemusia byť presne také, aké ste očakávali.
Zmeňte iba jednu vec
Pri testovaní vplyvu pH na aktivitu enzýmu meniť iba pH, pričom ostatné faktory udržiavať konštantné. Medzi tieto ďalšie faktory patrí koncentrácia enzýmov, koncentrácia substrátu a teplota. Faktory, ktoré zostávajú konštantné, sa nazývajú riadiace premenné. Kontrolné premenné umožňujú dospieť k záveru, že výsledky enzymatickej aktivity získané v experimente sú dôsledkom kolísania pH, nezávislej premennej. Vedieť, ktoré faktory sa v experimente nemenia, je rovnako dôležité ako vedieť, ktorý faktor sa má meniť, inak bude ťažké dospieť k záveru, či sú výsledky skutočne dôsledkom jednej veci, ktorá bola testované.
Vyberte jednu kyselinu alebo jednu bázu
PH roztoku je možné meniť rozpustením rôznych množstiev kyseliny alebo zásady vo vode. Jedným zo spôsobov, ako otestovať vplyv pH na aktivitu enzýmu, je postupné pridávanie kvapiek silnej kyseliny alebo silnej bázy do roztoku, ktorý obsahuje enzým, a potom pozorujte bod, v ktorom sa aktivita enzýmu spomalí alebo zastane. Kyselina je definovaná ako zlúčenina, ktorá daruje vodíkový ión, ktorá sa nazýva protón (H +), a zásada je definovaná ako zlúčenina, ktorá daruje hydroxidový ión (-OH). Rôzne kyseliny a zásady majú rôzny počet protónov alebo hydroxidových iónov na rozdávanie. Nie všetky protóny alebo hydroxidové ióny sa okamžite darujú, keď sa do roztoku pridá kyselina alebo zásada, ale počet darovaných protónov alebo hydroxidových iónov mení pH rôznymi rýchlosťami. Je preto dobré meniť pH v experimente s enzýmami, ktorý používa iba jeden typ kyseliny alebo jeden typ zásady. V opačnom prípade sa neúmyselne pridajú ďalšie premenné.
Tkanivá tiež menia pH
Niektoré laboratórne experimenty, ktoré skúmajú aktivitu enzýmov, zahŕňajú rozomletie čerstvého tkaniva na uvoľnenie enzýmov z buniek a potom pridanie substrátu na meranie aktivity enzýmu. Čerstvé tkanivo obsahuje krv. Vďaka prítomnosti enzýmov v krvi, ktoré menia plynný oxid uhličitý, ktorý sa v krvi rozpúšťa na kyselinu uhličitú, môže samotné tkanivo ovplyvňovať pH. Preto je v experimentoch, ktoré zahŕňajú aktivitu enzýmov v čerstvom tkanive, užitočné umyť krv v kadičke so studenou vodou pred rozdrobením tkaniva. Toto minimalizuje neúmyselnú zmenu pH v dôsledku tkaniva, aby bolo možné študovať cieľavedomú zmenu pH.
Veľkosti ponechajte rovnaké
Ako bolo diskutované vyššie, koncentrácia enzýmu je kontrolný faktor, ktorý by sa nemal meniť pri testovaní účinku pH na aktivitu enzýmu. Avšak experimentálne postupy stále neodmysliteľne menia koncentráciu enzýmov jemnými spôsobmi. Ak niekto používa čistý roztok enzýmov, potom musí udržiavať konštantnú koncentráciu enzýmu. Avšak v experimentoch, v ktorých je enzým z čerstvého tkaniva, ako sú kúsky zemiakov, kúsky rastlín alebo kúsky pečene, veľkosť kúskov mení množstvo enzýmu v každej skúmavke. Bude preto užitočné rezať kúsky tkaniva čo najrovnomernejšie. Toto je ďalší príklad toho, ako vedieť, čo sa nemá meniť a prečo je ťažké vyhnúť sa zmene úplne, pomáha interpretovať výsledky rôznych faktorov, ako je pH.