Ako identifikovať Enterobacter Aerogenes API 20E

Enterobacter aerogenes a ďalšie druhy Enterobacteriaceae sa dajú ľahko identifikovať pomocou testovacej súpravy API-20E. Táto súprava vyrobená spoločnosťou bioMeriuex Inc. obsahuje 20 mini-skúmaviek alebo jamiek na test. Test spočíva v naočkovaní čistej bakteriálnej suspenzie do testovacích jamiek a prečítaní farebných reakcií, ku ktorým dôjde. Identifikácia sa opiera o prevedenie výsledkov týchto farebných reakcií do sedemmiestneho kódu známeho ako Index analytického profilu. Priradenie tohto kódu k databáze výrobcu poskytuje identifikáciu organizmu.

Otvorte ampulku obsahujúcu 5 ml 0,85% chloridu sodného. Odstráňte jednu kolóniu z 18- až 24-hodinovej izolačnej platne pipetou a vložte ju do ampulky. Zmiešajte, aby ste získali homogénnu suspenziu. Použite toto odpruženie hneď, ako ho dokončíte.

Postavte inkubátor, ktorý sa skladá z voštinových jamiek, na tácke vybavenej vekom. Otvorte škatuľu a do jamiek na tácke pridajte 5 ml demineralizovanej alebo destilovanej vody. Rozbaľte prúžok, ktorý je súčasťou testovacej súpravy API 20E, a vložte ho do inkubačnej škatule.

Naplňte skúmavku a kanálik jamiek označených „GEL“, „VP“ a „CIT“ suspenziou, ktorú ste pripravili. Do zvyšných jamiek naplňte bakteriálnu suspenziu do skúmavky, nie však do kupulky. Pridajte minerálny olej do jamiek označených „ADH“, „ODC“, „LDC“, „URE“ a „H2S“, aby ste vytvorili anaeróbne prostredie.

Inkubačný box prikryte vekom a inkubujte pri teplote medzi 34 a 38 stupňami Celzia po dobu 18 až 24 hodín.

Sledujte jamky a zaznamenajte reakcie do tabuľky s výsledkami. Ak sú minimálne tri testy pozitívne, pokračujte farebnými reakciami pomocou chemických testovacích roztokov alebo reagencií dodaných so súpravou. Pridajte jednu kvapku činidla TDA do jamky označenej „TDA“ a kvapku každého z reagencií VP1 a VP2 do jamky dobre označenej „VP.“ Ak boli pozitívne menej ako tri testy, pred pridaním prúžky inkubujte ďalších 24 hodín činidlá.

Sledujte farebné zmeny vyvolané v jamkách. Červenohnedá farba v TDA naznačuje pozitívnu reakciu. Po pridaní reagencií zo súpravy do VP1 a VP2 počkajte 10 minút. Považujte červenú alebo ružovú farbu za pozitívnu a bledoružovú farbu, ktorá sa objaví po 10 minútach ako negatívna.

Vykonajte oxidázový test podľa pokynov výrobcu súpravy a zaznamenajte jeho výsledky spolu s výsledkami predchádzajúcich 20 testov.

Vložte toto sedemmiestne číslo profilu do databázy výrobcu súpravy pomocou telefónu s dotykovým tónom. Počkajte na získanie identifikácie poskytnutej databázou. Ak číslo profilu neposkytuje konkrétne výsledky, vykonajte doplňujúce skúšky špecifikované výrobcom súpravy.

  • Zdieľam
instagram viewer