HPLC ponúka rýchlu, automatizovanú a vysoko presnú metódu na identifikáciu určitých chemických zložiek vo vzorke, môže však byť nákladná, zložitá a nebude fungovať pre všetky vzorky. Lekárske, forenzné, environmentálne a výrobné laboratóriá používajú túto techniku na kvantifikáciu a oddelenie chemikálií vo vzorke. HPLC má v porovnaní s inými technikami výhody aj nevýhody.
HPLC a podobné techniky
Rovnako ako iné formy chromatografie umožňuje HPLC separáciu chemických zložiek pomocou mobilnej fázy a stacionárnej fázy. Mobilná fáza je kvapalná a stacionárna fáza je pevná. Pretože rôzne komponenty sa pohybujú rôznymi rýchlosťami, navzájom sa od seba oddeľujú. Alternatívne techniky zahŕňajú kapilárnu elektroforézu, pri ktorej látky migrujú cez roztoky v elektrine pole a ďalšie chromatografické metódy, ako je extrakcia na pevnej fáze, plynová chromatografia a tenká vrstva chromatografiou.
Rýchlosť, efektívnosť a presnosť
V porovnaní s inými chromatografickými technikami, ako je TLC, je HPLC mimoriadne rýchla a efektívna. Na pretlakovanie kvapalného rozpúšťadla tuhým adsorpčným materiálom využíva skôr čerpadlo než gravitáciu, pričom sa pri jeho pohybe rôznymi rýchlosťami oddeľujú rôzne chemické zložky. Proces je možné dokončiť za zhruba 10 až 30 minút a poskytuje vysoké rozlíšenie. Je presný a vysoko reprodukovateľný. Pretože je do značnej miery automatizovaný, je možné základné behy HPLC vykonávať s minimálnym zaškolením.
Náklady a zložitosť
Napriek svojim výhodám môže byť HPLC nákladná a vyžaduje veľké množstvo drahých organických látok. Techniky ako extrakcia na pevnej fáze a kapilárna elektroforéza môžu byť lacnejšie a ešte rýchlejšie, najmä pri analýze podľa správnej výrobnej praxe. Aj keď je relatívne ľahké použiť existujúce metódy HPLC, môže byť zložité riešiť problémy alebo vyvíjať nové metódy. Je to do veľkej miery kvôli rade rôznych modulov, stĺpcov a mobilných fáz.
Citlivosť a rozlíšenie
Všeobecne je HPLC všestranná a mimoriadne presná, pokiaľ ide o identifikáciu a kvantifikáciu chemických zložiek. S mnohými zahrnutými krokmi je presnosť HPLC do značnej miery na procese automatizovanom, a preto vysoko reprodukovateľnom. HPLC má na určité zlúčeniny nízku citlivosť a niektoré nemožno zistiť, pretože sú ireverzibilne adsorbované. Prchavé látky sa lepšie separujú plynovou chromatografiou.
