Tehnici de izolare pentru o placă cu dungi

Deși nu pot fi văzute cu ochiul liber, bacteriile sunt peste tot. Ele există în alimente, sol, apă, suprafețe în casele noastre, și în și pe corpurile noastre. Bacteriile există în general la populațiile mixte. Izolarea unei bacterii specifice din alte specii bacteriene într-o probă dată permite microbiologilor să studieze structura și funcția acesteia, caracteristicile utilizate în identificarea acesteia. Microbiologii izolează frecvent bacteriile folosind una din mai multe tehnici de plăci cu dungi.

Instrumente

O buclă de inoculare este utilizată pentru a transfera microorganisme. Se compune dintr-un sârmă de nicrom sau platină cu o buclă circulară mică la un capăt. Celălalt capăt este drept și alunecă într-un mâner. Sunt disponibile și bucle de inoculare de unică folosință din plastic. Bacteriile pot fi izolate numai dacă cresc. Microbiologii cultivă bacterii pentru izolarea plăcilor cu dungi în plăci Petri puțin adânci, rotunde, umplute cu un mediu solid, numit agar. Agar imită mediul în care bacteriile cresc în mod natural. Vasele umplute cu medii sunt sterile și acoperite pentru a preveni creșterea organismelor nedorite. În timpul izolării plăcii cu dungi, bucla de inoculare este sterilizată în mod repetat în flacăra unui arzător Bunsen.

Principiu

Tehnica plăcii cu dungi este cea mai populară metodă pentru izolarea bacteriilor specifice dintr-o probă care conține un amestec de microorganisme. Tehnica diluează în esență numărul de organisme și reduce densitatea acestora. Permite microbiologilor să distingă și să izoleze coloniile bacteriene individuale. O colonie este un grup vizibil de bacterii. Toate bacteriile dintr-o singură colonie provin din aceeași celulă bacteriană. În consecință, coloniile individuale sunt colonii „pure”. Colonia pură este transferată pe o altă placă pentru a produce o cultură pură constând dintr-un tip de bacterii.

Procedură

Când se face corect, izolarea plăcilor cu dungi subțiază un specimen și permite celulelor bacteriene individuale să se dezvolte în colonii izolate. Un microbiolog începe prin sterilizarea buclei de inoculare într-o flacără. Ea răcește bucla atingând-o pe agar, apoi scufundă bucla în eșantion și o întinde înainte și înapoi pentru a acoperi o secțiune a plăcii. Ea sterilizează bucla, o răcește și inoculează o a doua secțiune adiacentă a plăcii prin tragere bucla prin prima secțiune de mai multe ori și acoperind a doua secțiune folosind un zigzag mişcare. Aceasta preia un număr mic de bacterii din prima secțiune și le transferă în a doua secțiune. De câte ori se repetă această procedură de bază, depinde de metoda folosită a plăcii cu dungi. În ciuda metodei, eșantionul original este utilizat pentru a inocula numai prima secțiune a plăcii.

Metoda Streak Plate

Metodele plăcilor cu dungi variază în funcție de numărul de secțiuni de agar dungate. Metoda T-streak utilizează trei secțiuni: jumătatea superioară și două secțiuni inferioare de dimensiuni egale. Inoculul inițial este plasat în jumătatea superioară a plăcii. Bacteriile sunt târâte din secțiunea superioară către una dintre secțiunile inferioare, apoi din acea secțiune inferioară către cealaltă. În metoda cadranului, patru secțiuni de dimensiuni egale sunt dungate. Metoda de stripare continuă implică de obicei inocularea jumătății superioare a plăcii, rotirea acesteia cu 180 de grade, și inocularea celeilalte jumătăți ale plăcii fără a steriliza bucla sau a trage bacteriile din cea anterioară secțiune.

  • Acțiune
instagram viewer