Oamenii de știință și cercetătorii studiază creșterea bacteriilor prin pregătirea culturilor într-un laborator. Plăcile Petri care conțin agar nutritiv cresc culturi bacteriene dintr-o singură lovitură sau inoculare. Elevii pot pregăti agar nutrienți acasă folosind consumabile din magazinele alimentare sau din magazinele de produse naturiste pentru un proiect de târg științific. Aparatele de bucătărie convenționale și ustensilele de bucătărie de bază oferă instrumentele pentru a pregăti un mediu de cultură steril care poate fi distribuit în cutii Petri. Urmarea tehnicilor sterile prin încălzirea materialelor și menținerea suprafețelor curate și uscate va îmbunătăți rezultatele prin prevenirea formării și particulelor de contaminare a culturii.
Așezați un filtru de cafea într-o strecurătoare și agățați strecurarea peste deschiderea bolului transparent.
Turnați încet bulionul în filtru, asigurându-vă că bulionul nu se revarsă din părțile laterale ale filtrului. Dacă filtrul se înfundă cu particule, îndepărtați filtrul folosit, înlocuiți-l cu un filtru curat și continuați să turnați bulionul.
Scoateți strecurătorul și filtrați-l din partea superioară a vasului și observați dacă bulionul pare limpede (adică nu există particule suspendate în lichid). Dacă particulele plutesc în lichid, repetați pașii 1 și 2 folosind un al doilea castron limpede și un filtru de cafea proaspăt.
Așezați oala pe aragaz și turnați bulionul clar în oală.
Adăugați 16 uncii de apă distilată în oala care conține bulionul.
Porniți aragazul și reglați căldura la mediu-scăzut. Încălziți bulionul la foc mic (adică, bule mici apar lângă partea laterală a oalei).
Adăugați 1 linguriță de pulbere de agar-agar la bulionul care fierbe (aproximativ 2,5 grame) și amestecați amestecul până când pulberea este dizolvată. Asigurați-vă că amestecați pudra pentru a se dizolva și pentru a împiedica scufundarea gelatinei pe fundul vasului (unde poate arde).
Repetați pasul 7 până când toată pulberea de agar-agar a fost dizolvată în bulion.
Continuați să amestecați bulionul timp de aproximativ 1 minut pentru a vă asigura că toată pulberea este complet dizolvată.
Opriți aragazul, așezați capacul pe oală și lăsați lichidul să se răcească cel puțin 15 minute.
Aranjați vasele Petri sterile la rând pentru asamblare ușoară, dar nu îndepărtați capacele. Dacă doriți, plasați o placă pentru a ține oala caldă. Dacă utilizați cupe cu cremă cu capac în loc de cutii Petri, sterilizați cupele cu cremă plasând cupele și capacele inversat (cu susul în jos) pe o foaie de prăjitură acoperită cu folie și coaceți în cuptor cel puțin o oră la 375 grade Fahrenheit. Asigurați-vă că cupele și capacele sterilizate sunt complet răcite înainte de utilizare.
Atingeți cu grijă exteriorul vasului pentru a verifica dacă este cald la atingere și așezați vasul pe trivet. Dacă vasul este prea fierbinte pentru a fi atins, așteptați cel puțin 10 minute pentru a lăsa vasul să se răcească.
Scoateți capacul și puneți-l deoparte. Așezați oala în oală.
Îndepărtați capacul dintr-o farfurie Petri și distribuiți bulion de nutrienți pentru a umple farfuria la jumătate. Acoperiți vasul imediat cu capacul său.
Repetați Pasul 14 pentru fiecare dintre vasele Petri.
Lăsați bulionul de nutrienți să se solidifice în vasele Petri timp de cel puțin 1 oră, netulburat.
Scuturați ușor vasele Petri dintr-o parte în alta pentru a verifica dacă bulionul de nutrienți s-a solidificat complet. Dacă bulionul nu este complet gelificat, așteptați încă 20 de minute înainte de a verifica din nou.
Acoperiți o masă sau o suprafață plană cu o rolă de prosoape de hârtie pentru a crea o zonă sterilă de lucru. Scoateți o foaie de șervețel de hârtie și pliați-o de patru ori pentru a crea un tampon gros, dreptunghiular. Setați acest wad la un capăt al zonei de lucru.
Transferați o cutie Petri în zona de lucru sterilă și scoateți capacul. Întoarceți cu grijă vasul și puneți un capăt pe partea laterală a tamponului pliat, astfel încât să fie inversat și ușor înclinat (cu o ușoară distanță de tamponul de șervețel de hârtie).
Întoarceți capacul și plasați-l deasupra vasului Petri pe suprafața de lucru sterilă. Dacă pe capac apar picături de apă, scuturați ușor această umezeală înainte de a o pune pe suprafața acoperită, dar nu atingeți interiorul capacului.
Repetați pașii 19 și 20 pentru fiecare vas Petri, poziționând o parte a vasului inversat pe partea vasului precedent, mai degrabă decât pe tamponul de prosop de hârtie. Vasele vor apărea ca un set eșalonat, cu goluri pe o parte, astfel încât excesul de umiditate să se poată evapora.
Uită-te la vasele Petri inversate pentru a verifica dacă umezeala de pe părțile laterale ale plăcilor s-a evaporat. Odată ce s-a eliminat toată umezeala, întoarceți plăcile cu partea dreaptă în sus și acoperiți imediat cu capacele pentru utilizare.
Inoculați agarul nutritiv pe placă ștergând un tampon care conține cultura dorită pe suprafața agarului nutritiv înainte de a acoperi cu capacul. Întoarceți vasul Petri astfel încât solidul să fie deasupra. Păstrați vasul Petri inoculat cu solidul deasupra pentru cultivare și capacul de jos pentru a prinde umezeală, particule libere sau creștere.
Lucruri de care ai nevoie
- Filtre pentru cafea
- Filtru
- 2 boluri mari, clare
- 16 oz. bulion de vită fără grăsimi
- 16 oz. apa distilata
- Oală de gătit cu capac
- Cuptor
- 10 grame agar agar
- Lingură de măsurat
- Agitator
- Rulou de prosoape de hârtie
- Suporturi pentru oale
- Ladă metalică
- Cutii Petri sterile sau cupe transparente cu cremă
- Opțional: cronometru, trivet, cuptor, tigaie, folie de aluminiu, tigaie
sfaturi
Dacă pe capac apare umezeală excesivă, uscați și sterilizați capacele în cuptor setat la 375 grade Fahrenheit pentru cel puțin 1 oră (asigurați-vă că așezați capacele într-o tigaie curată tapetată cu folie de aluminiu înainte de a le introduce în cuptor).
Avertizări
-
Aveți grijă când manipulați vasul fierbinte pentru a evita arsurile. Dacă partea oalei este prea fierbinte, lichidul din oală este foarte fierbinte. Bulionul de substanțe nutritive trebuie să fie cald pentru a se distribui în vase, dar nu prea fierbinte pentru a produce o condensare excesivă în vasele Petri în timpul răcirii și prinderii.
Nu atingeți interiorul vasului Petri (de exemplu, farfurie sau capac) pentru a evita introducerea bacteriilor nedorite în cultură.