Testul Western blot, numit și imunoblotare, este un test pentru o proteină specifică dintr-un amestec de proteine. Testul Western blot se efectuează după electroforeză pe gel sau un test de test imunosorbent legat de enzime (ELISA) și folosește anticorpi pentru a identifica proteinele specifice.
Electroforeza pe gel de poliacrilamidă cu dodecil sulfat de sodiu (SDS-PAGE) este un test obișnuit utilizat pentru separarea proteinelor pentru utilizare în Western blot. Proteinele sunt separate prin greutate și proprietăți electrice pe măsură ce se deplasează printr-o matrice de gel.
Testul ELISA folosește enzime sau anticorpi atașați la o suprafață solidă pentru a crea suprafața de testare. O probă este apoi adăugată pe suprafața de testare. Anticorpii sau enzimele care reacționează sau se atașează la proteine indică un rezultat pozitiv.
Testul Western blot se efectuează după electroforeza pe gel. Proteinele separate sunt transferate (sau șterse) pe membrane de nitroceluloză sau nailon și identificate prin anticorpi specifici care sunt etichetați de o proteină secundară.
Testul Western blot este utilizat pentru a confirma rezultatele pozitive fie din gel-electroforeză, fie din testele ELISA. Testul Western blot poate identifica proteinele mai specific și poate exclude falsurile pozitive.