Soluțiile tampon rezistă modificărilor pH-ului deoarece conțin conjugați slab acid-bază care neutralizează ionii H + și OH-. Soluțiile tampon constau din acizi sau baze slabe și sarea acelui acid sau bază. Selectarea unui sistem tampon adecvat depinde de domeniul pH-ului pentru tamponare. Majoritatea reacțiilor biologice apar la un interval de pH de la 6 la 8. Tampoanele de fosfat tamponează în domeniul pH-ului de la 6,5 la 7,5. Tampoanele de acid carboxilic sunt utile de la pH 3 la 6. Tampoanele de borat funcționează de la pH 8,5 la 10. Tampoanele de aminoacizi, cum ar fi glicina și histidina, funcționează într-o diversitate de intervale de pH. Tamponul Tris este unul dintre cele mai frecvent utilizate sisteme de tampon în laboratoarele de biologie. Calculele pentru o soluție tampon Tris vor fi utilizate în exemplul următor, dar metodologia se aplică oricărei soluții tampon.
Folosiți produsul soluției finale molaritatea și volumul pentru a determina moli de bază necesare. De exemplu, dacă sunt necesari 2 litri dintr-o soluție 0,1 M de tampon Tris, atunci numărul de moli de Tris necesar este:
Calculați masa de tampon necesară înmulțind numărul de moli necesar cu greutatea moleculară a bazei. De exemplu, masa a 0,2 moli de bază Tris este egală cu:
Se dizolvă baza în apă distilată folosind o bară de agitare magnetică și agitând placa fierbinte. Se dizolvă într-un volum de apă doar puțin mai mic decât volumul final al soluției (950-975 mL pentru fiecare litru de soluție finală). PH-ul tamponului Tris se modifică odată cu concentrarea și are nevoie de reajustare dacă se folosește un volum inițial prea mic. De asemenea, este mai bine să pregătiți tamponul la aceeași temperatură pe care o va folosi în timpul testului sau experimentului, deoarece Tris are modificări mari ale temperaturii dependente de pH.
sfaturi
- Pentru a economisi timp atunci când pregătiți o soluție tampon, puteți utiliza concentrate tampon premade la pH-ul necesar și diluați pentru molaritatea și volumul dorit. Pregătiți soluția tampon la aceeași temperatură pe care o va folosi pentru a evita modificări semnificative ale pH-ului. Evitați ajustările de pH consumatoare de timp, titrați numai după diluarea la concentrația dorită. Dizolvarea într-un volum prea mic va duce la titrări repetate.
Avertizări
- Aveți grijă când manipulați acizi și baze. Purtați ochelari de protecție.
Despre autor
Carla Boulianne este biologă evoluționistă prin pregătire și scriitoare independentă prin pasiune. Pe lângă faptul că scrie pentru Demand Studios și eHow, este scenaristă pentru Parenting a Gifted Child la Suite101.com. Ea încântă să exploreze subiecte noi prin cercetări ample.
Credite foto
Fotografie prin amabilitatea lui Emmi P. @ morgueFile.com
