Bactérias são alguns dos organismos mais abundantes na Terra. Os cientistas estimam que há mais um trilhão de espécies diferentes de bactérias, no valor de mais de cinco milhões de trilhões de trilhões (sim, são dois trilhões separados) indivíduos no planeta.
De todas essas bactérias, no entanto, menos de 1 por cento causar doenças em humanos. Essas doenças podem variar de dores de estômago, como você pode pegar desde uma infecção leve, até doenças graves e fatais como a peste bubônica (causada pelo Yersinia pestis bactérias) que matou 50 milhões de pessoas no século XIV.
É por isso que a descoberta dos antibióticos, que são medicamentos que eliminam as bactérias, salvou tantas vidas. O problema com as bactérias é que elas se adaptam e evoluem muito rapidamente, o que faz com que cepas de bactérias resistentes a antibióticos se tornem cada vez mais comuns. Medindo o zona de inibição pois uma cepa de bactéria pode dizer aos cientistas e médicos se ela é resistente a um antibiótico.
Antibióticos e como eles funcionam
Os antibióticos são medicamentos que matam bactérias. Eles atuam alvejando e resultando na morte de células bacterianas, deixando as células humanas sozinhas. Cada antibiótico atua de uma maneira ligeiramente diferente, visando estruturas específicas de bactérias e sinalizando para eliminá-las.
Por exemplo, a penicilina (um dos antibióticos mais famosos) interfere nas paredes das células bacterianas, o que faz com que elas não funcionem adequadamente e, assim, morram. Os medicamentos que funcionam assim são chamados antibióticos beta-lactâmicos.
Antibióticos macrolídeos alvo de ribossomos bacterianos. Isso impede que as bactérias sintetizem proteínas, o que significa que as bactérias não podem sobreviver. Um exemplo comum é a eritromicina, um antibiótico usado para tratar uma variedade de infecções, incluindo bronquite e várias infecções de pele.
Antibióticos quinolonas são outro tipo comum de antibiótico que age interferindo no DNA bacteriano.
Teste de resistência a antibióticos
Após a descoberta inicial de antibióticos na década de 1920, os cientistas rapidamente perceberam que as bactérias eram evoluindo para ser resistente aos medicamentos. Muitos cientistas então tentaram criar métodos que lhes permitissem testar o quão suscetíveis as cepas bacterianas eram aos antibióticos para entender com o que estavam lidando, por assim dizer.
Os testes iniciais envolveram diluições em série de caldo bacteriano espalhado em placas com concentrações variáveis de antibiótico para determinar a suscetibilidade. Esse método demorou muito, entretanto.
O teste de Kirby-Bauer
É onde o Teste Kirby-Bauer entra. Este método foi padronizado por microbiologistas W. M. M. Kirby e A. C. Bauer. O teste leva cultura bacteriana pura e semeia em uma placa de ágar. Em seguida, um pequeno disco infundido com antibióticos (apropriadamente chamado de disco de antibiótico) é colocado na placa de ágar. Vários discos com diferentes antibióticos são colocados ao redor da placa e as bactérias são deixadas para incubar por um determinado período de tempo.
Assim que o disco for colocado na placa, os antibióticos começarão a se espalhar. Se a bactéria que está sendo estudada for sensível ao antibiótico, nenhuma bactéria crescerá perto do disco porque ele será morto pelo medicamento.
Mas, à medida que você se afasta do disco do antibiótico, a concentração do antibiótico diminui. A uma certa distância do disco, você começará a ver o crescimento bacteriano novamente porque a concentração do antibiótico é muito baixa para afetar as bactérias.
A área ao redor do disco do antibiótico que não apresenta crescimento bacteriano é conhecida como zona de inibição. A zona de inibição é uma zona uniformemente circular sem crescimento bacteriano ao redor do disco do antibiótico. Quanto maior for esta zona, mais sensível será a bactéria a esse antibiótico. Quanto menor for a zona, mais resistente (e, portanto, menos sensível) será a bactéria.
Como medir a zona de inibição
Além de nomear esta prática e protocolo, os cientistas Kirby e Bauer também criaram gráficos padronizados que usou o diâmetro da zona de inibição para determinar a sensibilidade ou resistência da bactéria ao bactérias.
Esses gráficos podem ser encontrados aqui e usar a espécie bacteriana, o tipo de antibiótico usado e o diâmetro da zona de inibição para determinar se a bactéria é resistente, sensível ou suscetível a esse antibiótico.
Observação: Você sempre mede a zona de inibição em milímetros.
Para medir a zona de inibição, primeiro coloque a placa em uma superfície não reflexiva. Pegue uma régua ou compasso que mede em milímetros e coloque o "0" no centro do disco do antibiótico. Meça do centro do disco até a borda da área com crescimento zero. Faça sua medição em milímetros.
Isso mede o raio da zona de inibição. Multiplique isso por dois para obter o diâmetro.
Você também pode medir diretamente através da zona de inibição de ponta a ponta cruzando o centro do disco do antibiótico para medir diretamente o diâmetro em vez de medir o raio.