O que é enumeração em microbiologia?

Microbiologia é o estudo de microrganismos: formas de vida unicelulares microscópicas ou quase invisíveis, como bactérias, arquéias, protozoários e alguns fungos, e até mesmo algumas plantas multicelulares extremamente pequenas, animais e fungos. Microbiologistas também estudam fenômenos não-organísmicos naturais, como vírus, príons, viróides e vírions. "Micróbio" é um termo genérico para todas essas entidades. A enumeração em microbiologia é a determinação do número de micróbios individuais viáveis ​​em uma amostra; quatro técnicas básicas são possíveis.

Uma medida direta para a enumeração microbiana é a contagem padrão em placas, também chamada de contagem viável. Para esta contagem você cultiva uma amostra diluindo-a, colocando-a em placas de meio de cultura e incubando-as por um determinado período de tempo. Você então conta o número de colônias e usa esse número para deduzir o número original de micróbios na amostra. Tecnicamente falando, uma contagem de placa não dá o número de micróbios individuais, mas sim de "formação de colônias unidades ", porque você não pode saber com certeza se cada colônia realmente veio de um único micróbio ou de um pequeno grupo de micróbios. No entanto, essas contagens são consideradas muito precisas para estimar o número de micróbios nas amostras originais. As desvantagens são que esse teste consome tempo e espaço e requer equipamento especializado que deve ser preparado corretamente.

As contagens microscópicas diretas, também chamadas de contagens totais de células, são outra forma de enumeração direta. Primeiro, você divide uma amostra em várias câmaras de tamanhos iguais. Em seguida, você determina o número médio de micróbios por câmara contando alguns ou todos sob um microscópio. Finalmente, você usa essa média para calcular o número na unidade original. A principal desvantagem das contagens microscópicas diretas é que é difícil distinguir os micróbios vivos dos mortos, portanto, esse método pode não fornecer uma enumeração viável precisa.

Os testes de turbidez são formas de enumeração indireta. Turbidez é a turvação de um líquido. Na medição turbidimétrica, você coloca uma amostra na solução, mede a turvação da nova solução iluminando-a com um espectrofotômetro, então estime o número de micróbios vivos que seriam necessários para produzir o nível de nebulosidade observado. A desvantagem aqui é que alguém já deve ter feito numerosas contagens de placa padrão do micróbio em questão em a fim de fazer soluções de amostra de turbidez variável, de modo que você tenha um padrão para medir sua amostra atual contra. Você também deve ter cuidado para não concentrar excessivamente sua amostra, porque uma contagem turbidimétrica só é precisa se nenhum micróbio na amostra estiver bloqueando qualquer outro. Em uma comparação de turbidez visual, você compara a turbidez de sua amostra com a turbidez de uma unidade do mesmo tamanho e contagem microbiana conhecida e estima uma enumeração com base nessa comparação.

Duas outras formas de enumeração indireta são a determinação da massa e a medição da atividade microbiana. Para uma enumeração de determinação de massa, você pesa a quantidade de matéria biológica em sua amostra, compare isso peso a uma curva padrão para contagens microbianas conhecidas e estimar o número microbiano original a partir deste comparação. Para uma medição de atividade microbiana, você mede a quantidade de um produto biológico em sua amostra, como resíduos metabólicos, em seguida, compare isso com uma curva padrão para contagens conhecidas e estime sua enumeração a partir deste comparação.