Técnicas de isolamento para uma placa listrada

Embora não possam ser vistas a olho nu, as bactérias estão por toda parte. Eles existem na comida, no solo, na água, nas superfícies de nossas casas e em nosso corpo. As bactérias geralmente existem em populações mistas. O isolamento de uma bactéria específica de outras espécies bacterianas em uma determinada amostra permite aos microbiologistas estudar sua estrutura e função, características utilizadas em sua identificação. Os microbiologistas freqüentemente isolam as bactérias usando uma das várias técnicas de placa estriada.

Uma alça de inoculação é usada para transferir microrganismos. Consiste em um nicrômio ou fio de platina com uma pequena alça circular em uma das extremidades. A outra extremidade é reta e desliza em uma alça. Anéis de inoculação descartáveis ​​de plástico também estão disponíveis. As bactérias só podem ser isoladas se crescerem. Microbiologistas cultivam bactérias para isolamento de placas em placas de petri rasas e redondas preenchidas com um meio sólido, chamado ágar. O ágar imita o ambiente no qual as bactérias crescem naturalmente. Os pratos cheios de mídia são estéreis e com tampa para evitar o crescimento de organismos indesejados. Durante o isolamento da placa listrada, a alça de inoculação é repetidamente esterilizada na chama de um bico de Bunsen.

A técnica de placa listrada é o método mais popular para isolar bactérias específicas de uma amostra contendo uma mistura de microorganismos. A técnica essencialmente dilui o número de organismos e reduz sua densidade. Ele permite aos microbiologistas distinguir e isolar colônias bacterianas individuais. Uma colônia é um aglomerado visível de bactérias. Todas as bactérias em uma única colônia se originam da mesma célula bacteriana. Conseqüentemente, as colônias individuais são colônias “puras”. A colônia pura é transferida para outra placa para produzir uma cultura pura consistindo de um tipo de bactéria.

Quando feito de maneira adequada, o isolamento da placa de linha afina uma amostra e permite que as células bacterianas individuais se desenvolvam em colônias isoladas. Um microbiologista começa esterilizando a alça de inoculação em uma chama. Ela resfria a alça tocando-a no ágar, depois mergulha a alça na amostra e a espalha para frente e para trás para cobrir uma seção da placa. Ela esteriliza a alça, resfria-a e inocula uma segunda seção adjacente da placa arrastando o loop através da primeira seção várias vezes e cobrindo a segunda seção usando um zigue-zague movimento. Isso pega um pequeno número de bactérias da primeira seção e as transfere para a segunda seção. O número de vezes que esse procedimento básico é repetido depende do método da placa listrada usado. Apesar do método, a amostra original é usada para inocular apenas a primeira seção da placa.

Os métodos de placa semeada variam de acordo com o número de seções de ágar semeadas. O método T-streak usa três seções: a metade superior e duas seções inferiores de tamanho igual. O inóculo inicial é colocado na metade superior da placa. As bactérias são arrastadas da seção superior para uma das seções inferiores e, em seguida, dessa seção inferior para a outra. No método do quadrante, quatro seções de tamanhos iguais são listradas. O método de listras contínuas normalmente envolve inocular a metade superior da placa, girando-a 180 graus, e inocular a outra metade da placa sem esterilizar a alça ou arrastar as bactérias da anterior seção.