É crucial testar os esporos em uma autoclave para ter certeza de que a autoclave está esterilizando o equipamento adequadamente. Testes de esporo, também conhecidos como testes de indicador biológico, testar se cepas altamente resistentes de esporos bacterianos sobrevivem ao processo de esterilização.
As autoclaves podem falhar devido a falhas mecânicas ou erros do operador, fazendo com que os microorganismos sobrevivam. Todos os operadores de autoclave devem estar familiarizados com o uso de esporos e testes de indicadores químicos.
Objetivo da Esterilização
A esterilização é o processo em que microorganismos são mortos para evitar seu crescimento e disseminação. Ao matar todos os microrganismos, pode-se ter certeza de que o equipamento ou objeto está limpo e seguro para uso no próximo projeto. A esterilização é considerada uma das precauções padrão usadas para prevenir a transmissão de bactérias, vírus e outros micróbios.
Diferentes indústrias usam esterilização para atingir objetivos diferentes. As indústrias de saúde esterilizam equipamentos para prevenir a propagação de doenças entre os pacientes. As indústrias de alimentos esterilizam para evitar o crescimento de bactérias nocivas que causam doenças. Os laboratórios de pesquisa usam esterilização para evitar contaminação cruzada entre as amostras.
Esterilização vs. Desinfecção
O objetivo da esterilização e da desinfecção é limpar objetos matando microorganismos. A desinfecção mata a maioria dos microorganismos, exceto coisas altamente resistentes, como esporos bacterianos.
Para que um processo ou substância seja classificado como esterilização, todos os microorganismos devem ser mortos.
Esporos bacterianos altamente resistentes
Os esporos bacterianos se formam quando as condições ambientais não são adequadas, ao contrário dos esporos de fungos, que fazem parte do processo reprodutivo. Eles mantêm o material genético (DNA) das células bacterianas seguro até que as condições sejam melhores e haja água e nutrientes suficientes para a sobrevivência da bactéria.
Três camadas, a parede do esporo, o córtex e o revestimento externo de queratina, protegem o DNA, que está contido em uma membrana citoplasmática no centro do esporo. Alguns esporos bacterianos têm enzimas como catalase resistente ao calor que fornecem aos esporos bacterianos proteção extra para mantê-los vivos por anos.
Tipos de esterilização
As formas mais comuns de esterilizar objetos são o uso de calor ou de produtos químicos como o glutaraldeído. Dependendo do objeto a ser esterilizado, muitas vezes é preferível usar esterilizadores térmicos porque os esterilizadores químicos são frequentemente altamente tóxicos e corrosivos.
Esterilizadores de calor podem usar calor seco ou vapor com temperaturas máximas acima de 121 graus Celsius (250 graus Fahrenheit) para matar microorganismos. As autoclaves utilizam o método de aquecimento a vapor e são o método de esterilização mais utilizado no mundo.
Esterilização em autoclave
As autoclaves funcionam removendo todo o ar da câmara central e substituindo-o por vapor quente usando uma bomba de vácuo ou método de deslocamento. Os objetos dentro da autoclave são então aquecidos a cerca de 270 graus Fahrenheit (132 graus Celsius) por aproximadamente 20 minutos.
Este processo gera altas pressões dentro da autoclave. A forma cilíndrica, mecanismo de travamento externo e válvula de segurança ajudam a máquina a lidar com a pressão.
Processo de autoclave de teste do Spore
Recomenda-se que os testes de esporos sejam realizados a cada semana para garantir que a autoclave esteja funcionando corretamente. Os testes de esporo contêm esporos bacterianos não patogênicos de espécies como Geobacillus stearothermophilus em um frasco ou impregnado em papel de filtro. É essencial seguir as instruções do fabricante do teste de esporos.
O processo de teste é tão simples quanto colocar o teste na autoclave entre outros instrumentos e executar um ciclo como de costume. Recomenda-se mover o local dos kits de teste de autoclave química e biológica pela câmara para identificar se há áreas que não estão sendo tratadas adequadamente.
A tira de teste ou frasco pode então ser enviado para análise ou colocado em uma incubadora no local para a cultura de qualquer bactéria que tenha sobrevivido. Se as bactérias cresceram, a esterilização não foi concluída.
Interpretando resultados
É importante notar que um resultado negativo não prova necessariamente que esterilização funcionou corretamente, mas um resultado positivo prova que algo deu errado.
Um resultado positivo pode ser devido a uma série de problemas, como falhas mecânicas, sobrecarga da câmara com equipamentos, configurações incorretas ou interrupção durante o ciclo. No caso de um resultado positivo, processos alternativos de esterilização devem ser implementados até que o problema seja resolvido.