Durante a cromatografia em camada fina, um técnico coloca pontos de uma mistura química em uma placa plana revestida com uma camada de material absorvente e, em seguida, coloca a parte inferior da placa em solvente. À medida que o solvente sobe na placa, os produtos químicos na mistura sobem com ele em taxas diferentes, de modo que se separam. Este teste determina quais produtos químicos estão em uma mistura, comparando as taxas de deslocamento de desconhecidos com padrões conhecidos. Os resultados, entretanto, podem ser afetados por muitos fatores.
TL; DR (muito longo; Não li)
Os valores do fator de retenção na cromatografia em camada delgada são afetados pelo absorvente, pelo solvente, pela própria placa de cromatografia, pela técnica de aplicação e pela temperatura do solvente e da placa.
Fatores de retenção
O fator de retenção de um produto químico durante a cromatografia em camada fina é uma medida de quão longe ele sobe na placa em resposta ao movimento do solvente. Como o movimento absoluto do produto químico depende da distância percorrida pelo solvente, você calcula os valores do fator de retenção relativos ao grau de movimento do solvente. O fator de retenção para um produto químico é a distância vertical movida pelo produto químico a partir do local onde estava originalmente aplicado à placa, dividido pela distância percorrida pelo solvente - medida a partir do mesmo início apontar.
Placa de cromatografia de camada fina
A própria placa de cromatografia em camada fina pode afetar o valor do fator de retenção obtido para um determinado produto químico. As placas de cromatografia em camada fina podem ser revestidas com uma variedade de sólidos absorventes; mais freqüentemente sílica ou alumina. Uma vez que o fator de retenção é baseado na afinidade relativa do produto químico para o absorvente em comparação com o solvente, alterar o absorvente pode alterar muito o fator de retenção. Além disso, a espessura e uniformidade da camada de absorvente podem variar de placa para placa, especialmente se forem feitas à mão. Esses fatores também podem alterar o valor do fator de retenção para produtos químicos.
Solvente Impacta Fatores de Retenção
Uma vez que o solvente carrega o produto químico pela placa, o solvente específico usado também terá um impacto substancial no valor do fator de retenção do produto químico. Um solvente que tem uma interação mais forte para um determinado produto químico superará mais facilmente qualquer afinidade do produto químico para a camada absorvente, e mova esse produto químico mais longe em um determinado período de Tempo. As misturas de solventes também podem ter efeitos diferentes dependendo da proporção de cada solvente.
Outros fatores
Existem alguns outros fatores que podem afetar o fator de retenção em alguns casos. A temperatura do solvente e da placa pode sofrer pequenas alterações, uma vez que, por exemplo, o solvente pode dissolver melhor os produtos químicos que está transportando em temperaturas mais altas. A técnica do técnico em aplicar a amostra à placa também pode alterar o fator de retenção. Aplicar muita amostra pode resultar em bandas grandes e difusas de produto químico subindo pela placa, tornando difícil medir com precisão a distância em que o produto químico foi transportado.