Enterobacter aerogenes e outras espécies de Enterobacteriaceae são fáceis de identificar usando o kit de teste API-20E. Este kit, fabricado pela bioMeriuex Inc., inclui 20 minotubos ou poços para o teste. O teste consiste em inocular uma suspensão bacteriana pura nos poços de teste e ler as reações de cor que ocorrem. A identificação depende da conversão dos resultados dessas reações de cor em um código de sete dígitos conhecido como Índice de Perfil Analítico. A correspondência deste código com o banco de dados do fabricante fornece uma identificação do organismo.
Abra uma ampola contendo 5 ml de meio de cloreto de sódio a 0,85 por cento. Remova uma única colônia de uma placa de isolamento de 18 a 24 horas com uma pipeta e adicione-a à ampola. Misture para obter uma suspensão homogênea. Use esta suspensão assim que terminar de prepará-la.
Configure uma caixa de incubação que consiste em poços alveolados em uma bandeja com tampa. Abra a caixa e adicione 5 ml de água desmineralizada ou destilada aos poços da bandeja. Desembale a tira fornecida no kit de teste API 20E e coloque-a na caixa de incubação.
Encha o tubo e a cúpula dos poços marcados com "GEL," "VP" e "CIT" com a suspensão que você preparou. Nos poços restantes, coloque a suspensão bacteriana no tubo, mas não na cúpula. Adicione óleo mineral nos poços marcados como "ADH", "ODC", "LDC", "URE" e "H2S" para criar um ambiente anaeróbico.
Cubra a caixa de incubação com a tampa e incube a uma temperatura entre 34 e 38 graus Celsius por 18 a 24 horas.
Observe os poços e observe as reações na folha de resultados. Desde que um mínimo de três testes sejam positivos, prossiga para as reações de cor usando as soluções de teste químico, ou reagentes, que vieram com o kit. Adicione uma gota de reagente TDA no bem marcado "TDA" e uma gota de cada um dos reagentes VP1 e VP2 nos bem marcados "VP." Se menos de três testes derem positivo, incube as tiras por mais 24 horas antes de adicioná-las reagentes.
Observe as mudanças de cor produzidas nos poços. Uma cor marrom avermelhada no TDA indica uma reação positiva. Aguarde 10 minutos após adicionar reagentes do kit em VP1 e VP2. Considere uma cor vermelha ou rosa como positiva e uma cor rosa pálida aparecendo após 10 minutos como negativa.
Realize o teste de oxidase conforme especificado pelo fabricante do kit e registre seus resultados junto com os resultados dos 20 testes anteriores.
Insira esse número de perfil de sete dígitos no banco de dados do fabricante do kit por meio de um telefone multifreqüencial. Aguarde o recebimento da identificação fornecida pelo banco de dados. Se o número do perfil não fornecer resultados específicos, execute os testes suplementares especificados pelo fabricante do kit.