Quais são as condições adequadas para a autoclave?

Autoclaves são máquinas de laboratório que aquecem seu conteúdo sob condições de pressão elevada. Como um forno moderno, eles podem ser predefinidos em relação à temperatura e ao tempo de aquecimento. Existe um controle adicional para pressão. O principal uso das autoclaves é esterilizar equipamentos e outros itens de laboratório, como reagentes.

Para preparar a autoclave para uso, despeje 1 galão, ou aproximadamente 4 litros, de água no fundo da autoclave. Geralmente, há uma marca ou saliência para indicar onde esse volume termina. Em seguida, coloque o equipamento na autoclave e feche a porta. Certifique-se de seguir os protocolos adequados para carregamento e posicionamento do equipamento, bem como o tipo de exaustão da autoclave, todos os quais dependem do tipo de equipamento sendo colocado na autoclave. Da mesma forma, certifique-se de seguir todos os protocolos de segurança para remover o equipamento após o ciclo de autoclave ter sido executado.

A temperatura padrão para uma autoclave é 121 graus Celsius. Para ter uma ideia de como é quente, considere que corresponde a aproximadamente 250 graus Fahrenheit. Em outras palavras, é mais quente do que água fervente. A razão para isso é que simplesmente trazer algo até a temperatura de água fervente, 100 graus Celsius (212 graus Fahrenheit), não é suficiente para esterilizá-lo porque os esporos bacterianos podem sobreviver a essa temperatura. Em contraste, 121 graus Celsius quase sempre é suficiente para esterilização.

Às vezes, os líquidos precisam ser esterilizados. A maioria dos líquidos biológicos e reagentes de laboratório são principalmente água. Como a água ferve a 100 graus Celsius na pressão padrão, não seria possível aquecê-la a qualquer temperatura mais alta do que em condições de pressão padrão. Como resultado, é necessário aumentar a pressão circundante para 1 atmosfera, ou 15 libras por polegada quadrada, acima do normal pressão a fim de aumentar o ponto de ebulição efetivo da água para 121 graus Celsius (o ponto de ebulição varia diretamente com pressão).

O tempo necessário para realizar a esterilização depende de quanto equipamento está na autoclave para ser esterilizado. Para pequenos lotes de equipamentos e reagentes, ou seja, onde nenhum recipiente contém mais de 1 litro de líquido, o tempo padrão é de 15 minutos. Para lotes médios, ou seja, recipientes com entre 1 litro e 1 galão de líquido, o tempo deve ser aumentado para 30 minutos. Para grandes lotes, ou seja, recipientes com mais de 1 galão de líquido, o tempo usado deve ser de uma hora.