Quais são os diferentes tipos de microscopia usados ​​em um laboratório de microbiologia?

O microscópio é uma das ferramentas mais importantes do microbiologista. Foi inventado em 1600, quando Anton van Leeuwenhoek construiu um modelo simples de tubo, lente de aumento e palco para fazer as primeiras descobertas visuais de bactérias e células sanguíneas circulantes. Hoje em dia, a microscopia é essencial na área médica para fazer novas descobertas celulares, e os tipos de microscópios podem ser classificados com base nos princípios físicos que utilizam para gerar uma imagem.

Alguns dos osciloscópios mais comuns encontrados em laboratórios usam luz visível projetada para iluminar e ampliar um objeto. O escopo de luz mais básico, uma dissecação ou estereomicroscópio, permite a visualização de um organismo inteiro de uma só vez, enquanto mostra detalhes como as antenas de uma borboleta com ampliação de 100x a 150x. Os escopos compostos, usados ​​para maiores detalhes celulares, contêm dois tipos de lentes que funcionam para ampliar organismos unicelulares de 1000 a 1500 vezes. Mais especializados são os microscópios de campo escuro e de contraste de fase, que espalham a luz para capturar não apenas células vivas, mas até partes celulares internas, como as mitocôndrias.

O microscópio fluorescente ou confocal usa luz ultravioleta como fonte de luz. Quando a luz ultravioleta atinge um objeto, ela excita os elétrons do objeto, emitindo luz em várias cores, o que pode ajudar a identificar bactérias dentro de um organismo. Ao contrário dos escopos compostos e de dissecação, os microscópios fluorescentes mostram o objeto através de um orifício confocal, portanto, uma imagem completa da amostra não é mostrada. Isso aumenta a resolução, fechando a luz fluorescente externa e criando uma imagem tridimensional limpa da amostra.

A fonte de energia usada no microscópio eletrônico é um feixe de elétrons. O feixe tem um comprimento de onda excepcionalmente curto e aumenta a resolução da imagem significativamente em microscopia de luz. Objetos inteiros são revestidos de ouro ou paládio, que desvia o feixe de elétrons, criando áreas escuras e claras como imagens 3D visualizadas em um monitor. Detalhes como as complexas conchas de sílica das diatomáceas marinhas e detalhes da superfície dos vírus podem ser capturados. Ambos os microscópios eletrônicos de transmissão (TEM) e os mais novos microscópios eletrônicos de varredura (SEM) se enquadram nesta categoria especializada de microscopia.

Como o nome sugere, esses microscópios usam um feixe de raios X para criar uma imagem. Ao contrário da luz visível, os raios X não refletem ou refratam facilmente e são invisíveis ao olho humano. A resolução da imagem de um microscópio de raios-X fica entre a de um microscópio óptico e a de um elétron microscópio, e é sensível o suficiente para determinar a colocação individual dos átomos dentro das moléculas de um cristal. Em contraste com a microscopia eletrônica, em que o objeto é seco e fixado, esses microscópios altamente especializados são capazes de mostrar células vivas.