Quer você precise ou não de desgaseificar, ou desaerar, sua solução tampão dependerá de sua aplicação. Se a presença de oxigênio em excesso no buffer afetará a reação química que você está procurando, ou se a formação de bolhas de ar na solução afetará as leituras ou fluxo, você terá que desgaseificar seu amortecedor. Este artigo pressupõe que você já preparou seu buffer e o filtrou, se necessário.
A desgaseificação por vácuo é a maneira mais comum de remover o ar de uma solução tampão. Coloque sua solução em um frasco de braço lateral com uma barra de agitação e use uma rolha de borracha para selar o topo. Coloque o frasco em uma placa de agitação e vire a placa de forma que a barra de agitação esteja girando em uma velocidade média. Isso ajuda a retirar o ar da solução. Conecte a mangueira para o sistema de vácuo ao braço lateral do frasco e ligue o vácuo em uma taxa baixa. Deixe a solução desgaseificar por pelo menos uma hora.
Usando a mesma configuração com o frasco de braço lateral e vácuo, você pode omitir a placa de agitação e a barra de agitação e colocar o frasco em um sonicador. O sonicador usa ondas sonoras que liberarão mais ar de sua solução do que a barra de agitação.
A aspersão de hélio - também chamada de borbulhamento de hélio ou purga de gás inerte - é uma das maneiras mais eficazes de desgaseificar seu buffer se você tiver uma linha de hélio em seu laboratório. Coloque uma frita de pulverização - um conector que tem um filtro semelhante a uma pedra na extremidade - na extremidade da linha de hélio e coloque a linha e a frita em sua solução. Ligue o hélio em uma pressão muito baixa por cerca de cinco minutos para permitir que o hélio remova o oxigênio. Isso pode ter que ser repetido diariamente.
Alguns sistemas de cromatografia terão um desgaseificador de solução em linha. O sistema removerá o gás do buffer antes de ser enviado para a coluna de cromatografia. Você não precisa desgaseificar sua solução de antemão. No entanto, se houver ruído de linha de base em seu cromatograma, você deve considerar a desgaseificação usando um dos métodos acima, além de usar o desgaseificador em linha.