Mikrobiolog stosuje barwienie chitynowe, aby wyraźnie widzieć grzyby pod mikroskopem. Grzyby wykorzystują chitynę jako materiał strukturalny w swoich ścianach komórkowych, dzięki czemu plama dobrze pokazuje ścianę komórkową. Najczęstszą plamą grzybów jest niebieska plama z bawełny laktofenolowej. Fenol zabija mikroorganizmy i zapobiega rozkładowi komórek przez enzymy grzybowe. Bawełniany niebieski barwnik zmienia kolor chitynowy na niebieski. Barwienie chitynowe jest stosunkowo prostą procedurą przy użyciu niedrogich materiałów. Możesz zrobić własny barwnik lub kupić komercyjnie przygotowaną bejcę.
Przygotuj roztwór błękitnej bawełny laktofenolowej. Odważ 0,05 grama niebieskiego barwnika bawełny, używając delikatnej wagi. Wymieszaj barwnik z 20 mililitrami wody destylowanej w probówce i pozostaw na noc.
Załóż rękawiczki przed zakończeniem przygotowania plam następnego dnia. Do zlewki wlać 20 ml kwasu mlekowego i wymieszać z 20 g kryształków fenolu. Mieszaj, aż mieszanina się rozpuści. Dodaj 40 ml glicerolu i wymieszaj. Następnie przecedź roztwór błękitu bawełny przez kawałek bibuły filtracyjnej do zlewki i dokładnie wymieszaj.
Ewentualnie użyj dostępnego w handlu źródła plamy. Przechowuj plamę w temperaturze pokojowej.
Oznaczyć szkiełko mikroskopowe nazwą lub numerem identyfikacyjnym próbki. Użyj jednego sterylnego zakraplacza, aby umieścić pojedynczą kroplę próbki wody na środku szkiełka mikroskopowego. W przypadku suchej próbki umieścić na szkiełku pojedynczą kroplę 70-procentowego roztworu alkoholu, a następnie za pomocą sterylnej ezy zmieszać suchą próbkę z alkoholem.
Za pomocą czystego zakraplacza nanieś dwie krople błękitnego barwnika laktofenolowego na środek szkiełka. Jeśli używasz 70-procentowego alkoholu na szkiełku, zrób to, zanim alkohol wyparuje ze szkiełka.
Dotknij jedną krawędzią szkiełka nakrywkowego mikroskopu do jednej krawędzi mokrego preparatu próbki. Pozwól szkiełkowi delikatnie opaść na preparat próbki, upewniając się, że pod szkiełkiem nie zostaną uwięzione pęcherzyki powietrza. Zabarwiona próbka jest teraz gotowa do badania pod mikroskopem.
