Naukowcy i badacze badają wzrost bakterii, przygotowując kultury w laboratorium. Na szalkach Petriego z agarem odżywczym hodowane są kultury bakterii po jednym przetarciu lub zaszczepieniu. Uczniowie mogą przygotować odżywczy agar w domu, korzystając z materiałów spożywczych lub sklepów ze zdrową żywnością na potrzeby projektu Science Fair. Konwencjonalne urządzenia kuchenne i podstawowe przybory kuchenne zapewniają narzędzia do przygotowania sterylnej pożywki hodowlanej, którą można dozować na szalkach Petriego. Stosowanie sterylnych technik polegających na ogrzewaniu materiałów i utrzymywaniu powierzchni w czystości i suchości poprawi wyniki, zapobiegając zanieczyszczeniu kultury przez pleśń i cząstki.
Umieść filtr do kawy w sitku i zawieś sitko nad otworem przezroczystego naczynia.
Powoli wlewaj bulion do filtra, upewniając się, że bulion nie przelewa się z boków filtra. Jeśli filtr zostanie zatkany cząsteczkami, usuń zużyty filtr, wymień go na czysty i kontynuuj nalewanie bulionu.
Wyjmij sitko i filtr z górnej części miski i obserwuj, czy bulion wydaje się klarowny (tj. nie ma zawieszonych cząstek w płynie). Jeśli w płynie unoszą się cząsteczki, powtórz kroki 1 i 2, używając drugiej przezroczystej miski i filtra świeżej kawy.
Postaw garnek na kuchence i wlej klarowny bulion do garnka.
Dodaj 16 uncji wody destylowanej do garnka zawierającego bulion.
Włącz piec i ustaw temperaturę na średnio-niską. Podgrzej bulion na wolnym ogniu (przy boku garnka pojawią się małe bąbelki).
Dodaj 1 łyżeczkę proszku agar-agar do gotującego się bulionu (około 2,5 grama) i mieszaj, aż proszek się rozpuści. Pamiętaj, aby wymieszać proszek, aby się rozpuścił i zapobiec opadaniu żelatyny na dno garnka (gdzie może się spalić).
Powtarzaj krok 7, aż cały proszek agarowo-agarowy rozpuści się w bulionie.
Kontynuuj mieszanie bulionu przez około 1 minutę, aby upewnić się, że cały proszek się całkowicie rozpuścił.
Wyłącz kuchenkę, umieść pokrywkę na garnku i pozwól płynowi ostygnąć przez co najmniej 15 minut.
Ułóż sterylne szalki Petriego w rzędzie, aby ułatwić montaż, ale nie zdejmuj pokrywek. W razie potrzeby umieść podstawkę do podtrzymywania ciepłego garnka. Jeśli zamiast szalek Petriego używasz kubków z kremem z pokrywką, wysterylizuj kubki z kremem, umieszczając kubki i pokrywki odwrócone (do góry nogami) na blasze pokrytej folią i piec w piekarniku przez co najmniej godzinę w temperaturze 375 stopni Fahrenheita. Upewnij się, że wysterylizowane kubki i pokrywki są całkowicie schłodzone przed użyciem.
Ostrożnie dotknij zewnętrznej strony garnka, aby sprawdzić, czy jest ciepła w dotyku i umieść garnek na podstawce. Jeśli garnek jest zbyt gorący, aby go dotknąć, odczekaj co najmniej 10 minut, aby garnek ostygł.
Zdejmij pokrywkę i odstaw na bok. Umieść chochlę w garnku.
Zdejmij pokrywkę z jednej szalki Petriego i dodaj bulion odżywczy, aby wypełnić szalkę do połowy. Natychmiast przykryj naczynie pokrywką.
Powtórz krok 14 dla każdej z szalek Petriego.
Pozostaw pożywny bulion do zestalenia się na szalkach Petriego przez co najmniej 1 godzinę, bez przeszkód.
Delikatnie potrząśnij szalkami Petriego na boki, aby sprawdzić, czy bulion odżywczy całkowicie się zestalił. Jeśli bulion nie jest całkowicie zżelowany, odczekaj kolejne 20 minut przed ponownym sprawdzeniem.
Przykryj stół lub płaską powierzchnię rolką ręczników papierowych, aby stworzyć sterylne miejsce pracy. Oderwij arkusz ręcznika papierowego i złóż go cztery razy, aby utworzyć gruby, prostokątny zwitek. Umieść ten zwitek na jednym końcu obszaru roboczego.
Przenieś jedną szalkę Petriego do sterylnego obszaru roboczego i zdejmij pokrywkę. Ostrożnie odwróć naczynie i połóż jeden koniec z boku złożonego zwitka, tak aby leżał odwrócony i lekko pochylony (z niewielkim odstępem przy zwiniętym ręczniku papierowym).
Odwróć pokrywkę i umieść ją nad szalką Petriego na sterylnej powierzchni roboczej. Jeśli na pokrywce pojawią się krople wody, delikatnie strzepnij tę wilgoć przed umieszczeniem na przykrytej powierzchni, ale nie dotykaj wewnętrznej strony pokrywki.
Powtórz kroki 19 i 20 dla każdej szalki Petriego, umieszczając jedną stronę odwróconej szalki z boku poprzedniej szalki, a nie zwitek ręcznika papierowego. Naczynia będą układać się naprzemiennie, ze szczelinami po jednej stronie, aby nadmiar wilgoci mógł odparować.
Spójrz na odwrócone szalki Petriego, aby sprawdzić, czy wilgoć po bokach płytek wyparowała. Gdy cała wilgoć zostanie usunięta, odwróć płytki prawą stroną do góry i natychmiast przykryj pokrywkami do użycia.
Zaszczepić pożywkę agarową na płytkę, wycierając wymazówką zawierającą żądaną kulturę o powierzchnię agaru odżywczego przed przykryciem pokrywką. Odwróć szalkę Petriego tak, aby ciało stałe znalazło się na wierzchu. Przechowuj zaszczepioną szalkę Petriego z ciałem stałym na wierzchu do hodowli, a pokrywką na dole, aby wyłapać wilgoć, luźne cząstki lub wzrost.
Rzeczy, których będziesz potrzebować
- Filtry do kawy
- Filtr
- 2 duże, przezroczyste miski
- 16 uncji. beztłuszczowy bulion wołowy
- 16 uncji. woda destylowana
- Garnek z pokrywką
- Kuchenka
- 10 gramów agaru
- Łyżka miarowa
- Mieszadło
- Rolka ręczników papierowych
- Posiadacze garnków
- Kadź metalowa
- Sterylne szalki Petriego lub przezroczyste kubki do kremu z pokrywkami
- Opcjonalnie: minutnik, podstawka, piekarnik, patelnia, folia aluminiowa, patelnia
Wskazówki
Jeśli na pokrywkach pojawi się nadmierna wilgoć, wysusz i wysterylizuj pokrywki w piekarniku ustawionym na 375 stopni Fahrenheita przez co najmniej 1 godzinę (upewnij się, że pokrywki zostały umieszczone w czystej patelni wyłożonej folią aluminiową przed włożeniem ich do piekarnik).
Ostrzeżenia
-
Zachowaj ostrożność podczas obsługi gorącego garnka, aby uniknąć oparzeń. Jeśli bok garnka jest zbyt gorący, płyn w garnku jest bardzo gorący. Bulion odżywczy powinien być ciepły, aby można go było dozować do szalek, ale nie za gorący, aby podczas chłodzenia i wiązania na szalkach Petriego doszło do nadmiernej kondensacji.
Nie dotykaj wnętrza szalki Petriego (tj. płytki lub pokrywki), aby uniknąć wprowadzenia niepożądanych bakterii do kultury.