Selv om de ikke kan sees med det blotte øye, er bakterier overalt. De finnes i mat, jord, vann, overflater i hjemmene våre, og i og på kroppene våre. Bakterier eksisterer vanligvis i blandede populasjoner. Isolering av en bestemt bakterie fra andre bakteriearter i en gitt prøve tillater mikrobiologer å studere dens struktur og funksjon, egenskaper som brukes i identifikasjonen. Mikrobiologer isolerer ofte bakterier ved hjelp av en av flere stripeplate-teknikker.
Verktøy
En inokuleringssløyfe brukes til å overføre mikroorganismer. Den består av en nikrom eller platinatråd med en liten, sirkulær sløyfe i den ene enden. Den andre enden er rett og glir inn i et håndtak. Plast engangs inokuleringsløkker er også tilgjengelig. Bakterier kan bare isoleres hvis de vokser. Mikrobiologer dyrker bakterier for isolering av stripeplater i grunne, runde petriskåler fylt med et fast medium, kalt agar. Agar etterligner miljøet der bakteriene naturlig vokser. De mediefylte rettene er sterile og dekket for å forhindre vekst av uønskede organismer. Under isolering av stripeplater blir inokuleringssløyfen gjentatte ganger sterilisert i flammen til en Bunsen-brenner.
Prinsipp
Strekplate-teknikken er den mest populære metoden for å isolere spesifikke bakterier fra en prøve som inneholder en blanding av mikroorganismer. Teknikken fortynner i hovedsak antall organismer og reduserer dens tetthet. Det lar mikrobiologer skille og isolere individuelle bakteriekolonier. En koloni er en synlig bakterieklynge. Alle bakteriene i en enkelt koloni stammer fra den samme bakteriecellen. Derfor er individuelle kolonier "rene" kolonier. Den rene kolonien overføres til en annen plate for å produsere en ren kultur bestående av en type bakterier.
Fremgangsmåte
Når det er gjort riktig, tynner strekplateisolasjonen ut et eksemplar og gjør det mulig for individuelle bakterieceller å utvikle seg til isolerte kolonier. En mikrobiolog begynner med å sterilisere inokuleringssløyfen i en flamme. Hun kjøler sløyfen ved å berøre den til agaren, dypper deretter sløyfen i prøven og sprer den frem og tilbake for å dekke en del av platen. Hun steriliserer løkken, kjøler den og inokulerer en andre, tilstøtende del av platen ved å dra løkken gjennom den første seksjonen flere ganger og dekker den andre delen ved hjelp av en sikksakk bevegelse. Dette plukker opp et lite antall bakterier fra første del og overfører dem til andre seksjon. Antall ganger denne grunnleggende prosedyren gjentas avhenger av strekplatemetoden som brukes. Til tross for metoden brukes den originale prøven til å kun inokulere den første delen av platen.
Streak Plate Method
Metoder for strekkplate varierer etter antall strekede agarsnitt. T-streak-metoden bruker tre seksjoner: øvre halvdel og to like store bunnseksjoner. Det første inokulatet plasseres i den øverste halvdelen av platen. Bakterier blir dratt fra toppseksjonen til en av bunnseksjonene, deretter fra den nederste seksjonen til den andre. I kvadranten metoden er fire like store seksjoner stripete. Den kontinuerlige strippemetoden innebærer vanligvis inokulering av den øverste halvdelen av platen, og den roteres 180 grader, og inokulere den andre halvdelen av platen uten å sterilisere sløyfen eller dra bakterier fra den forrige seksjon.
