Forskere og forskere studerer bakterievekst ved å forberede kulturer i et laboratorium. Petriskåler som inneholder næringsagar, vokser bakteriekulturer fra en enkelt sveipe eller inokulering. Studentene kan tilberede næringsagar hjemme ved hjelp av forsyninger fra dagligvarebutikker eller helsekostbutikker for et vitenskapsmessig prosjekt. Konvensjonelle kjøkkenutstyr og grunnleggende kjøkkenutstyr gir verktøyene for å tilberede et sterilt kulturmedium som kan dispenseres i petriskåler. Å følge sterile teknikker ved å varme opp materialene og holde overflatene rene og tørre vil forbedre resultatene ved å forhindre at mugg og partikler forurenser kulturen.
Legg et kaffefilter i en sil og heng silen over åpningen av den klare bollen.
Hell langsomt buljongen i filteret, og pass på at buljongen ikke renner over fra sidene av filteret. Hvis filteret blir tilstoppet med partikler, fjerner du det brukte filteret, erstatter det med et rent filter og fortsetter å helle buljongen.
Fjern silen og filteret fra toppen av bollen, og observer om buljongen virker klar (dvs. det er ingen suspenderte partikler i væsken). Hvis partikler flyter i væsken, gjenta trinn 1 og 2 med en annen klar bolle og et nytt kaffefilter.
Legg gryten på ovnen og hell den klare buljongen i gryten.
Tilsett 16 gram destillert vann i gryten som inneholder buljongen.
Slå på ovnen og juster varmen til middels lav. Varm buljongen til en simmer (dvs. små bobler vises nær siden av gryten).
Tilsett 1 ts agar-agarpulver i den kokende buljongen (ca. 2,5 gram) og rør blandingen til pulveret er oppløst. Sørg for å røre pulveret for å oppløse det og forhindre at gelatinen synker til bunnen av gryten (hvor det kan brenne).
Gjenta trinn 7 til alt agar-agarpulver er oppløst i buljongen.
Fortsett å røre buljongen i ca. 1 minutt for å sikre at alt pulver er fullstendig oppløst.
Slå av ovnen, legg lokket på gryten og la væsken avkjøles i minst 15 minutter.
Ordne de sterile petriskålene på rad for enkel montering, men ikke fjern lokket. Hvis det er ønskelig, legg en trekk for å holde den varme gryten. Hvis du bruker vaniljesaus vaniljesaus kopper i stedet for petriskåler, sterilisere vaniljesaus kopper ved å plassere kopper og lokk invertert (opp ned) på et foliedekket kakeark og stek i ovnen i minst en time ved 375 grader Fahrenheit. Forsikre deg om at de steriliserte koppene og lokkene er helt avkjølte før bruk.
Berør forsiktig utsiden av gryten for å kontrollere at den er varm å ta på, og legg gryten på stivet. Hvis gryten er for varm til å berøre, vent minst 10 minutter for å la gryta avkjøles.
Fjern lokket og sett til side. Legg øse i kjelen.
Fjern lokket fra en petriskål og tilfør næringsbuljong for å fylle fatet halvveis. Dekk fatet umiddelbart med lokket.
Gjenta trinn 14 for hver av petriskålene.
La næringsbuljongen stivne i petriskålene i minst 1 time, uforstyrret.
Rist petriskålene forsiktig side om side for å sjekke at næringsbuljongen har stivnet helt. Hvis buljongen ikke er helt gelert, vent ytterligere 20 minutter før du sjekker igjen.
Dekk et bord eller en flat overflate med en rull papirhåndklær for å skape et sterilt arbeidsområde. Riv et ark papirhåndkle og brett det fire ganger for å lage en tykk, rektangulær vad. Sett dette vadet i den ene enden av arbeidsområdet.
Overfør en petriskål til det sterile arbeidsområdet og fjern lokket. Snu fatet forsiktig og legg den ene enden på siden av det brettede vadet, slik at det ligger omvendt og litt vinklet (med et lite gap mellom papirhåndkleet).
Snu lokket og legg det over petriskålen på den sterile arbeidsflaten. Hvis det vises vanndråper på lokket, rist denne fuktigheten forsiktig av før du legger den på den tildekkede overflaten, men ikke berør innsiden av lokket.
Gjenta trinn 19 og 20 for hver petriskål, og plasser den ene siden av det omvendte fatet på siden av forrige fat i stedet for papirhåndkleet. Oppvasken vil fremstå som et forskjøvet sett, med hull på den ene siden slik at overflødig fuktighet kan fordampe.
Se på de omvendte petriskålene for å sjekke om fuktigheten på sidene av platene fordampet. Når all fuktighet har ryddet, snur du platene med høyre side opp og dekker straks med lokkene for bruk.
Voks næringsagaren på platen ved å tørke av en vattpinne som inneholder ønsket kultur på næringsagaroverflaten før du dekker til med lokket. Snu petriskålen slik at det faste stoffet er på toppen. Oppbevar den inokulerte petriskålen med det faste stoffet på toppen for dyrking og lokket på bunnen for å fange opp fuktighet, løse partikler eller vekst.
Ting du trenger
- Kaffefiltre
- Sil
- 2 store, klare boller
- 16 oz. fettfri kjøttkraft
- 16 oz. destillert vann
- Kokepotte med lokk
- Komfyr
- 10 gram agaragar
- Måleskje
- Rører
- Rulle med papirhåndklær
- Grytekluter
- Metalsleiv
- Sterile petriskåler eller klare vaniljesauser med lokk
- Valgfritt: tidtaker, servise, stekeovn, panne, aluminiumsfolie, panne
Tips
Hvis det oppstår for mye fuktighet på lokkene, tørk og steriliser lokkene i ovnen som er satt til 375 grader Fahrenheit i minst 1 time (sørg for å plassere dekslene i en ren panne foret med aluminiumsfolie før du setter dem i stekeovn).
Advarsler
-
Vær forsiktig når du håndterer den varme gryten for å unngå forbrenning. Hvis siden av gryten er for varm, er væsken i gryten veldig varm. Næringsbuljongen skal være varm for å dispensere i oppvasken, men ikke for varm til å produsere overdreven kondens i petriskålene under avkjøling og herding.
Ikke berør innsiden av petriskålen (dvs. plate eller lokk) for å unngå å innføre uønskede bakterier i kulturen.