Under tynnsjiktskromatografi plasserer en tekniker flekker av en kjemisk blanding på en flat plate belagt med et lag med absorberende materiale, og setter den nedre delen av platen i løsemiddel. Når løsningsmiddel beveger seg oppover i platen, beveger kjemikalier i blandingen seg med forskjellige hastigheter, slik at de skilles. Denne testen bestemmer hvilke kjemikalier som er i en blanding ved å sammenligne ukjente reiser med kjente standarder. Resultatene kan imidlertid påvirkes av mange faktorer.
TL; DR (for lang; Leste ikke)
Retensjonsfaktorverdier i tynnlagskromatografi påvirkes av absorbenten, løsningsmidlet, selve kromatografiplaten, påføringsteknikk og temperaturen på løsningsmidlet og platen.
Retensjonsfaktorer
Retensjonsfaktoren for et kjemikalie under tynnlagskromatografi er et mål på hvor langt det beveger seg oppover platen som svar på løsemiddelbevegelsen. Siden kjemikaliets absolutte bevegelse avhenger av hvor langt løsningsmidlet beveger seg, beregner du retensjonsfaktorverdier i forhold til graden av løsemiddelbevegelse. Retensjonsfaktoren for et kjemikalie er den vertikale avstanden som kjemikaliet beveger seg fra stedet der det var ble opprinnelig påført platen, delt på avstanden som løsningsmidlet gikk - målt fra samme start punkt.
Tynnlags kromatografiplate
Tynnsjiktskromatografiplaten i seg selv kan påvirke retensjonsfaktorverdien oppnådd for et gitt kjemikalie. Tynnsjiktskromatografiplater kan belegges med en rekke absorberende faste stoffer; hyppigst silisiumdioksyd eller aluminiumoksyd. Siden retensjonsfaktoren er basert på kjemikaliets relative affinitet for absorbenten sammenlignet med løsningsmidlet, kan endring av absorbenten i stor grad endre retensjonsfaktoren. Dessuten kan tykkelsen og ensartetheten av laget med absorberende materiale variere fra plate til plate, spesielt hvis de er håndlaget. Disse faktorene kan også endre retensjonsfaktorverdien for kjemikalier.
Faktorer for oppbevaring av løsemiddel
Siden løsningsmidlet fører kjemikaliet opp på platen, vil det spesielle løsningsmidlet som brukes også ha en betydelig innvirkning på retensjonsfaktorverdien for kjemikaliet. Et løsemiddel som har en sterkere interaksjon for et bestemt kjemikalie, vil lettere overvinne ethvert kjemikaliets affinitet for det absorberende laget, og flytt kjemikaliet lenger i en gitt periode på tid. Blandinger av løsningsmidler kan også ha forskjellige effekter avhengig av andelen av hvert løsningsmiddel.
Andre faktorer
Det er noen få andre faktorer som i noen tilfeller kan påvirke retensjonsfaktoren. Temperaturen på løsningsmidlet og platen kan gjøre små endringer, siden for eksempel løsningsmidlet ofte kan bedre oppløse kjemikaliene det transporterer ved høyere temperaturer. Teknikeren til å påføre prøven på platen kan også endre retensjonsfaktoren. Bruk av for mye prøve kan føre til at store, diffuse kjemikaliebånd beveger seg oppover platen, noe som gjør det vanskelig å måle avstanden kjemikaliet har blitt transportert nøyaktig.