Voedingsagar is een soort complex medium voor algemene doeleinden dat voornamelijk wordt gebruikt voor de teelt van een verscheidenheid aan micro-organismen.
Complexe media microbiologie zijn groeimedia die zijn samengesteld uit een reeks beschikbare voedingsstoffen en eiwitmoleculen in onbekende concentraties. Voedingsagar wordt gebruikt voor het kweken van niet-kieskeurige microben zoals bacteriën en gist.
Wat groeit er op voedingsagar?
Micro-organismen hebben voedsel, water en een geschikte omgeving nodig om te overleven en te groeien. Nutriënten agar biedt deze bronnen voor vele soorten microben, van schimmels zoals gist en schimmel voor gewone bacteriën zoals Streptokokken en Stafylokokken.
De microben die op complexe media zoals voedingsagar kunnen worden gekweekt, kunnen worden beschreven als: niet kieskeurige organismen. Niet-kiezende organismen zijn microben die kunnen groeien en gedijen zonder speciale voedings- of omgevingsomstandigheden.
Sommige bacteriën kunnen niet worden gekweekt met voedingsagarmedium.
Kieskeurige organismen (kieskeurige bacteriën) hebben mogelijk een zeer specifieke voedselbron nodig die niet in voedingsagar wordt geleverd. Een voorbeeld van een kieskeurig organisme is: Treponema pallidum, bacteriën die syfilis veroorzaken. Wetenschappers proberen deze bacterie al meer dan 100 jaar tevergeefs in een cultuur te laten groeien.Voedingsagar kan voor verschillende doeleinden worden gebruikt om micro-organismen te kweken. Een gebruik is de teelt en het onderhoud van specifieke kolonies van niet-kieskeurige organismen voor wetenschappelijke studie of identificatie. Een ander gebruik is het detecteren en kwantificeren van de aanwezigheid van potentieel schadelijke bacteriën of andere microben in water, rioolwater, schaaldieren, vlees, zuivel en andere voedingsmiddelen.
Het medium moet steriel worden gehouden om ervoor te zorgen dat de enige microben die groeien, de microben zijn die bedoeld zijn voor kweek, en niet groeien als gevolg van besmetting van het medium.
Voedings-agar-ingrediënten
de belangrijkste ingrediënten in voedingsagar zijn pepton, rundvleesextract en agar. Deze ingrediënten worden verpoederd en vervolgens toegevoegd aan gedestilleerd water. De specifieke samenstelling van voedingsstoffen agar kan enigszins variëren, afhankelijk van de fabrikant en de bron van de gebruikte ingrediënten.
De samenstelling van het bereide voedingsagarmedium is 0,5 procent pepton, 0,3 procent rundvleesextract (of gistextract), 1,5 procent agar en 0,5 procent natriumchloride.
agar definiëren
Om agar te definiëren, denk aan een complex koolhydraat afkomstig van rode zeealgen dat als een stollingsmiddel in het voedingsmedium fungeert. Het heeft geen voedingswaarde voor de te kweken microben.
Agar geleert bij een temperatuur van 113 graden Fahrenheit (45 graden Celsius) en smelt bij 203 graden Fahrenheit (95 graden Celsius). Agar bevat ook variëteiten van voedingskwaliteit die kunnen worden gebruikt als verdikkingsingrediënt voor soepen, gelei en ander voedsel.
Peptondefinitie
De definitie van pepton is een oplosbaar eiwit dat wordt gevormd in de vroege stadia van eiwitafbraak tijdens het verteringsproces. Het wordt gemaakt door eiwitmaterialen zoals vlees, gelatine en caseïne gedeeltelijk te verteren met behulp van zuren of enzymen.
Het doel van pepton in het voedingsagarmedium is om de primaire bron van organische stikstof te leveren voor de groeiende microbiële cultuur, en het kan ook een bron van koolhydraten en vitamines zijn. De exacte samenstelling van pepton in de voedingsbodem is afhankelijk van de eiwitbron en de wijze van vertering.
Vleesextract
De vleesextract gebruikt om het voedingsagar-medium te maken, is een mengsel van in water oplosbare deeltjes van dierlijk weefsel, koolhydraten, organische stikstofverbindingen, vitamines en zout.
Gistextract kan ook worden gebruikt om voedingsagar te maken en biedt vergelijkbare verbindingen. Het doel van de verbindingen in rundvleesextract is om te helpen bij de groei van de bacteriën die worden gekweekt op het voedingsagar-medium.
Gedistilleerd water
Gedistilleerd water wordt meestal gebruikt om het voedingsagarmedium te maken. Gedestilleerd water is water dat is verwerkt om alle opgeloste verontreinigingen en mineralen te verwijderen.
Het gedestilleerde water dat aanwezig is in het voedingsagarmedium is nodig voor de levensprocessen van de micro-organismen die daar groeien, net zoals water essentieel is voor de levensprocessen van alle levende wezens. De toevoeging van natriumchloride aan het mengsel maakt de kweekomgeving vergelijkbaar met: cytoplasma.
Het voedingsagarmedium voorbereiden
Om goed te kunnen een voedingsagarmengsel bereiden voor bacteriecultuur is het belangrijk om de specifieke instructies van de fabrikant van de voedingsstoffen te raadplegen. Sommige ingrediënten of hoeveelheden kunnen enigszins variëren, afhankelijk van de bron van de voedingsagar.
- Los 28 gram voedingsagarpoeder op in één liter gedestilleerd water.
- Verwarm het mengsel aan de kook, onder voortdurend roeren. Blijf koken en roer het mengsel ongeveer een minuut of totdat al het poeder is opgelost.
- Autoclaaf het opgeloste mengsel gedurende 15 minuten bij 249,8 graden Fahrenheit (121 graden Celsius).
- Laat het agarmengsel iets afkoelen. Verdeel over borden of buizen. Laat stollen.
- Plaats de deksels terug en bewaar in een koele, donkere en steriele omgeving zoals de koelkast. Winkel agarplaten (Petrischaaltjes) ondersteboven om condensvorming op het medium te voorkomen.
De uiteindelijke pH van het bereide voedingsagarmedium moet 6,8 zijn. Het medium moet licht amberkleurig zijn en de consistentie hebben van stevige gelatine. Bereid agar-voedselmedium moet maximaal twee jaar in de koelkast blijven staan, tenzij er een duidelijke verandering in het uiterlijk van het medium is die op besmetting zou wijzen.
