Wanneer u het effect van pH op enzymactiviteit test, moet u de pH variëren. U kunt dit echter op een goede of een slechte manier doen. Houd in gedachten welke extra factoren de effecten van variërende pH kunnen verstoren. Anders zijn de verkregen resultaten mogelijk niet te wijten aan de verandering in pH, maar aan een andere factor. Als u weet hoe u de pH op de juiste manier kunt variëren en welke factoren de pH van een experiment in de war brengen, kunt u goede resultaten krijgen en begrijpen waarom uw resultaten misschien niet precies zijn wat u had verwacht.
Verander maar één ding
Varieer bij het testen van het effect van pH op enzymactiviteit alleen de pH terwijl u andere factoren constant houdt. Deze andere factoren omvatten enzymconcentratie, substraatconcentratie en temperatuur. De factoren die constant blijven worden de controlevariabelen genoemd. Met controlevariabelen kunt u concluderen dat de resultaten op de enzymactiviteit die in uw experiment zijn verkregen, te wijten zijn aan het variëren van de pH, de onafhankelijke variabele. Weten welke factoren je in een experiment niet moet veranderen, is net zo belangrijk als weten welke factor je moet variëren, anders zal het moeilijk zijn om te concluderen of de resultaten daadwerkelijk te wijten zijn aan het enige dat was getest.
Kies één zuur of één base
De pH van een oplossing kan worden veranderd door verschillende hoeveelheden van een zuur of een base in water op te lossen. Een manier om het effect van de pH op de enzymactiviteit te testen, is door geleidelijk druppels van een sterk zuur of een sterke base toe te voegen in de oplossing die het enzym bevat, en observeer vervolgens het punt waarop de enzymactiviteit vertraagt of stopt. Een zuur wordt gedefinieerd als een verbinding die een waterstofion afstaat, een proton (H+) genoemd, en een base wordt gedefinieerd als een verbinding die een hydroxide-ion (-OH) afstaat. Verschillende zuren en basen hebben verschillende aantallen protonen of hydroxide-ionen om weg te geven. Niet alle protonen of hydroxide-ionen worden onmiddellijk gedoneerd wanneer een zuur of base aan een oplossing wordt toegevoegd, maar het aantal gedoneerde protonen of hydroxide-ionen verandert de pH met verschillende snelheden. Het is dus een goed idee om de pH in een enzymexperiment te variëren met slechts één type zuur of één type base. Anders worden er onbedoeld andere variabelen toegevoegd.
Weefsels veranderen ook de pH
Sommige laboratoriumexperimenten die de enzymactiviteit bestuderen, omvatten het vermalen van vers weefsel om de enzymen uit de cellen vrij te maken en vervolgens het toevoegen van substraat om de enzymactiviteit te meten. Vers weefsel bevat bloed. Door de aanwezigheid van enzymen in het bloed die het kooldioxidegas dat in het bloed wordt opgelost in koolzuur veranderen, kan het weefsel zelf de pH beïnvloeden. Dus bij experimenten waarbij enzymactiviteit in vers weefsel betrokken is, is het nuttig om het bloed in een beker koud water af te wassen voordat het weefsel wordt vermalen. Dit minimaliseert de onbedoelde pH-verandering als gevolg van het weefsel, zodat de doelbewuste verandering in pH kan worden bestudeerd.
Houd de maten hetzelfde
Zoals hierboven besproken, is de enzymconcentratie een controlefactor die niet mag worden gevarieerd bij het testen van het effect van de pH op de enzymactiviteit. Experimentele procedures variëren echter nog steeds inherent de enzymconcentratie op subtiele manieren. Als men een zuivere oplossing van enzymen gebruikt, moet de enzymconcentratie constant worden gehouden. Bij experimenten waarbij het enzym afkomstig is van vers weefsel, zoals stukjes aardappel, stukjes plant of stukjes lever, verandert de grootte van de stukjes echter de hoeveelheid enzym in elke reageerbuis. Het is dus nuttig om de stukjes weefsel zo uniform mogelijk te snijden. Dit is nog een voorbeeld van hoe weten wat je niet moet veranderen, en waarom het moeilijk is om verandering niet volledig te vermijden, helpt bij het interpreteren van de resultaten van het variëren van een factor zoals pH.