Enterobacter aerogenes en andere soorten Enterobacteriaceae zijn gemakkelijk te identificeren met behulp van de API-20E-testkit. Deze kit, vervaardigd door bioMeriuex Inc., bevat 20 minibuisjes of putjes voor de test. De test bestaat uit het enten van een zuivere bacteriesuspensie in de testputjes en het aflezen van de kleurreacties die optreden. Identificatie berust op het omzetten van de resultaten van deze kleurreacties in een zevencijferige code die bekend staat als de Analytical Profile Index. Het matchen van deze code met de database van de fabrikant geeft een identificatie van het organisme.
Open een ampul met 5 ml natriumchloride 0,85 procent medium. Verwijder een enkele kolonie van een 18 tot 24 uur oude isolatieplaat met een pipet en voeg deze toe aan de ampul. Meng tot een homogene suspensie. Gebruik deze suspensie zodra u klaar bent met het bereiden ervan.
Zet een incubatiedoos die bestaat uit honingraatputten in een bak met een deksel. Open de doos en voeg 5 ml gedemineraliseerd of gedestilleerd water toe aan de bakjes. Pak de strip uit de API 20E-testkit uit en plaats deze in de incubatiedoos.
Vul het buisje en de cupule van de putjes gemarkeerd met "GEL", "VP" en "CIT" met de suspensie die u hebt voorbereid. Vul in de resterende putjes de bacteriesuspensie in de buis, maar niet in het napje. Voeg minerale olie toe aan de putjes die zijn gemarkeerd met "ADH", "ODC", "LDC", "URE" en "H2S" om een anaërobe omgeving te creëren.
Bedek de incubatiedoos met het deksel en incubeer bij een temperatuur tussen 34 en 38 graden Celsius gedurende 18 tot 24 uur.
Observeer de putjes en noteer de reacties op het resultatenblad. Als minimaal drie tests positief zijn, gaat u verder met de kleurreacties met behulp van de chemische testoplossingen of reagentia die bij de kit zijn geleverd. Voeg een druppel TDA-reagens toe aan de goed gemarkeerde "TDA" en een druppel elk van de VP1- en VP2-reagentia in de goed gemarkeerde "VP." Als minder dan drie tests positief uitvallen, incubeer de strips dan nog eens 24 uur voordat u deze toevoegt reagentia.
Observeer de kleurveranderingen die in de putjes worden geproduceerd. Een roodbruine kleur in TDA duidt op een positieve reactie. Wacht 10 minuten na het toevoegen van reagentia uit de kit aan VP1 en VP2. Beschouw een rode of roze kleur als positief en een lichtroze kleur die na 10 minuten als negatief verschijnt.
Voer de oxidasetest uit zoals gespecificeerd door de fabrikant van de kit en noteer de resultaten ervan samen met de resultaten van de vorige 20 tests.
Voer dit zevencijferige profielnummer in de database van de fabrikant van de kit in via een druktoetstelefoon. Wacht tot u de identificatie ontvangt die door de database wordt verstrekt. Als het profielnummer geen specifieke resultaten geeft, voer dan de aanvullende tests uit die zijn gespecificeerd door de fabrikant van de kit.
