Enterobacter aerogenes un citas Enterobacteriaceae sugas ir viegli identificēt, izmantojot API-20E testa komplektu. Šajā komplektā, ko ražo bioMeriuex Inc., testam ir iekļautas 20 mini caurules vai iedobes. Tests sastāv no tīras baktēriju suspensijas inokulēšanas testa iedobēs un notikušo krāsu reakciju nolasīšanas. Identifikācija balstās uz šo krāsu reakciju rezultātu pārvēršanu septiņciparu kodā, kas pazīstams kā analītiskā profila indekss. Šī koda saskaņošana ar ražotāja datu bāzi ļauj identificēt organismu.
Atveriet ampulu, kas satur 5 ml nātrija hlorīda 0,85 procentu barotnes. No 18 līdz 24 stundas vecas izolācijas plāksnes ar pipeti noņem vienu koloniju un pievieno ampulā. Sajauc, lai iegūtu viendabīgu suspensiju. Izmantojiet šo suspensiju, tiklīdz esat to gatavojis.
Paplātē ar vāku uzstādiet inkubācijas kastīti, kas sastāv no šūnveida akām. Atveriet kastīti un paplātes iedobēs pievienojiet 5 ml demineralizēta vai destilēta ūdens. Izpakojiet API 20E testa komplektā esošo sloksni un ievietojiet to inkubācijas kastē.
Ar jūsu sagatavoto suspensiju piepildiet mēģeni un urbumu kupolu ar marķējumu "GEL", "VP" un "CIT". Atlikušajās iedobēs baktēriju suspensiju iepilda mēģenē, bet ne kupolā. Pievienojiet minerāleļļu akās, kas apzīmētas ar "ADH", "ODC", "LDC", "URE" un "H2S", lai izveidotu anaerobu vidi.
Pārklājiet inkubācijas kārbu ar vāku un inkubējiet 18 līdz 24 stundas temperatūrā no 34 līdz 38 grādiem pēc Celsija.
Novērojiet akas un atzīmējiet reakcijas rezultātu lapā. Ja vismaz trīs testi ir pozitīvi, pārejiet pie krāsu reakcijām, izmantojot komplektā iekļautos ķīmiskos testa šķīdumus vai reaģentus. Pievienojiet vienu pilienu TDA reaģenta labi apzīmētā "TDA" un pilienu katra VP1 un VP2 reaģenta labi marķētā - VP. Ja mazāk nekā trīs testi izrādījās pozitīvi, inkubējiet sloksnes vēl 24 stundas, pirms pievienojat tos reaģenti.
Novēro akās radušās krāsas izmaiņas. TDA sarkanbrūna krāsa norāda uz pozitīvu reakciju. Pagaidiet 10 minūtes pēc reaģentu pievienošanas no komplekta VP1 un VP2. Uzskatiet sarkanu vai rozā krāsu par pozitīvu un bāli rozā krāsu, kas parādās pēc 10 minūtēm, kā negatīvu.
Veic oksidāzes testu, kā norādījis komplekta ražotājs, un reģistrē tā rezultātus kopā ar iepriekšējo 20 testu rezultātiem.
Ievadiet šo septiņciparu profila numuru komplekta ražotāja datu bāzē, izmantojot skārienjūtīgu tālruni. Pagaidiet, līdz saņemat datu bāzes sniegto identifikāciju. Ja profila numurs nesniedz konkrētus rezultātus, veiciet papildu testus, ko norādījis komplekta ražotājs.