Mokslininkai ir tyrėjai tiria bakterijų augimą, paruošdami kultūras laboratorijoje. Petri lėkštelėse, kuriose yra maistinių agarų, išauginamos bakterijų kultūros iš vieno perbraukimo ar inokuliacijos. Moksleiviai gali paruošti maistinių medžiagų agarą namuose naudodamiesi maisto prekių ar sveiko maisto parduotuvių reikmenimis mokslo mugės projektui. Įprasti virtuvės prietaisai ir pagrindiniai virtuvės reikmenys suteikia įrankių paruošti sterilią terpę, kurią galima išpilstyti į Petri lėkšteles. Laikantis sterilių metodų kaitinant medžiagas ir išlaikant paviršius švarius ir sausus, rezultatai bus geresni, nes pelėsiai ir dalelės negalės užteršti kultūros.
Į filtrą įdėkite kavos filtrą ir pakabinkite koštuvą ant skaidraus dubenėlio angos.
Lėtai supilkite sultinį į filtrą, įsitikinkite, kad sultinys neperpildo iš filtro šonų. Jei filtras užsikemša dalelėmis, nuimkite naudotą filtrą, pakeiskite jį švariu filtru ir toliau pilkite sultinį.
Nuimkite koštuvą ir filtrą iš dubens viršaus ir stebėkite, ar sultinys atrodo skaidrus (t. Y. Skystyje nėra suspenduotų dalelių). Jei skystyje sklando dalelės, pakartokite 1 ir 2 veiksmus naudodami antrą skaidrų dubenį ir šviežios kavos filtrą.
Padėkite puodą ant viryklės ir supilkite skaidrų sultinį į puodą.
Į puodą su sultiniu įpilkite 16 uncijų distiliuoto vandens.
Įjunkite viryklę ir sureguliuokite vidutinę ir žemą šilumą. Įkaitinkite sultinį iki virimo (t. Y. Šalia puodo šono atsiranda nedideli burbuliukai).
Į verdantį sultinį (maždaug 2,5 gramo) įpilkite 1 arbatinį šaukštelį agaro-agaro miltelių ir maišykite mišinį, kol milteliai ištirps. Nepamirškite išmaišyti miltelių, kad ištirptų, ir neleiskite želatinai nugrimzti į puodo dugną (ten, kur ji gali degti).
Pakartokite 7 veiksmą, kol sultinyje ištirps visi agaro-agaro milteliai.
Toliau maišykite sultinį apie 1 minutę, kad visi milteliai visiškai ištirptų.
Išjunkite viryklę, uždėkite puodo dangtį ir leiskite skysčiui atvėsti mažiausiai 15 minučių.
Išdėstykite sterilius Petri lėkšteles iš eilės, kad jas būtų lengviau surinkti, tačiau dangtelių neišimkite. Jei norite, įdėkite triverį, kad laikytumėte šiltą puodą. Jei vietoj petri patiekalų naudojate kreminius puodelius su dangčiu, sterilizuokite kreminius puodelius uždėdami puodelius ir dangčius apverstą (apverstą) ant folija padengto sausainių lakšto ir kepkite orkaitėje mažiausiai vieną valandą 375 laipsnių temperatūroje. Farenheitas. Prieš naudodami įsitikinkite, kad sterilizuoti puodeliai ir dangteliai yra visiškai atvėsę.
Atsargiai palieskite puodo išorę, kad patikrintumėte, ar jis yra šiltas, ir padėkite puodą ant padėkliuko. Jei puodas yra per karštas liesti, palaukite mažiausiai 10 minučių, kad puodas atvėstų.
Nuimkite dangtį ir padėkite į šalį. Įdėkite kaušą į puodą.
Nuimkite vienos Petri lėkštelės dangtį ir išpilstykite maistinių medžiagų sultinį, kad indas būtų užpildytas iki pusės. Indą nedelsdami uždenkite jo dangčiu.
Pakartokite 14 žingsnį kiekvienam iš Petri patiekalų.
Leiskite maistinių medžiagų sultiniui netrikdomai sustingti Petri lėkštelėse mažiausiai 1 valandą.
Švelniai pakratykite Petri lėkšteles vienas prie kito, kad patikrintumėte, ar maistinių medžiagų sultinys visiškai sustingo. Jei sultinys nėra visiškai gelintas, palaukite dar 20 minučių, kol vėl patikrinsite.
Uždenkite stalą ar plokščią paviršių popierinių rankšluosčių ritiniu, kad sukurtumėte sterilią darbo vietą. Nuplėškite popierinio rankšluosčio lapą ir keturis kartus sulenkite, kad susidarytų stora, stačiakampė vata. Uždėkite šį vatą viename darbo zonos gale.
Perkelkite vieną Petri lėkštelę į sterilią darbo vietą ir nuimkite dangtį. Indą atsargiai apverskite ir uždėkite vieną galą ant sulankstytos vatos pusės, kad ji gulėtų apversta ir šiek tiek pasvirusi (su nedideliu tarpu prie popierinio rankšluosčio vatos).
Apverskite dangtį ir padėkite jį virš petri lėkštelės ant sterilaus darbinio paviršiaus. Jei ant dangtelio atsiranda vandens lašelių, prieš padėdami ant padengto paviršiaus, švelniai purtykite šią drėgmę, tačiau nelieskite dangtelio vidaus.
Pakartokite 19 ir 20 veiksmus kiekvienam Petri lėkštelei, vieną apversto indo pusę padėkite ant ankstesnio indo, o ne popierinio rankšluosčio vatos. Indai pasirodys kaip padalytas rinkinys, kurių vienoje pusėje bus tarpai, kad drėgmės perteklius galėtų išgaruoti.
Pažvelkite į apverstus Petri lėkšteles, kad patikrintumėte, ar išgaravo drėgmė lėkščių šonuose. Išvalius visą drėgmę, plokštes pasukite į dešinę į viršų ir nedelsdami uždenkite dangčiais.
Inokuliuokite maistinį agarą į plokštelę, prieš uždengdami dangčiu, ant maistinių agaro paviršiaus nuvalydami tamponą su norima kultūra. Petri lėkštelę apverskite taip, kad kieta medžiaga būtų viršuje. Užkrėstą Petri lėkštelę laikykite kultivavimui viršuje esančia kieta dalimi, o dugne - dangčiu, kad sulaikytų drėgmę, birias daleles ar užaugimą.
Dalykai, kurių jums prireiks
- Kavos filtrai
- Koštuvas
- 2 dideli, skaidrūs dubenėliai
- 16 oz. be riebalų jautienos sultinys
- 16 oz. Distiliuotas vanduo
- Virimo puodas su dangčiu
- Viryklė
- 10 gramų agaro agaro
- Matavimo šaukštas
- Maišytuvas
- Popierinių rankšluosčių ritinys
- Puodų laikikliai
- Metalinis kaušas
- Sterilūs petri patiekalai arba skaidrūs kreminiai puodeliai su dangteliais
- Neprivaloma: laikmatis, „trivet“, orkaitė, keptuvė, aliuminio folija, keptuvė
Patarimai
Jei ant dangtelių atsiranda per daug drėgmės, išdžiovinkite ir sterilizuokite dangčius orkaitėje, nustatytoje 375 laipsnių pagal Celsijų. mažiausiai 1 valanda (prieš uždėdami dangtelius, dangčius įdėkite į švarią keptuvę, išklotą aliuminio folija orkaitė).
Įspėjimai
-
Laikykitės karšto puodo, būkite atsargūs, kad išvengtumėte nudegimų. Jei puodo pusė per karšta, puode esantis skystis yra labai karštas. Maistinių medžiagų sultinys turi būti šiltas, kad būtų galima išpilstyti į indus, bet ne per karštas, kad aušinant ir stingstant Petri lėkštelėse susidarytų per didelis kondensatas.
Nelieskite petri lėkštelės vidinės pusės (t. Y. Plokštelės ar dangtelio), kad išvengtumėte nepageidaujamų bakterijų į kultūrą.