Mikrobiologai, genetikai ir molekuliniai biologai, norėdami sužinoti gyvenimo paslaptis, naudoja bakterijų kultūras. Mikrobiologai tiria bakterijas, kad atrastų naujus antibiotikus infekcijoms gydyti. Genetikai naudoja bakterijas norėdami nustatyti, ar cheminės medžiagos gali turėti kancerogeninių savybių. Molekuliniai biologai tiria ląstelių procesų biocheminius kelius, kad suprastų fermentų, kuriuos mes turime bendrus su bakterijomis, funkcijas. Kad ir kokie įvairūs būtų tyrimai, visi trys mokslai išskiria bakterijų kultūras naudodami tą pačią techniką: agaro plokštelių dryžavimą.
Mikrobų pagrindai
•••Chadas Bakeris / Photodisc / Getty Images
Mikrobai yra vienaląsčiai organizmai, tokie kaip bakterijos ir grybai. Šie organizmai greitai dauginasi ir yra lengvai auginami, todėl juos ypač naudinga tirti. Kai gamtoje atrandamas potencialiai naujas mikrobas, mėginys dedamas į auginimo terpę, vadinamą „sultiniu“. Sultiniai susideda iš sterilizuoto vandens, druskų, cukrų ir kitų maistinių medžiagų, kurios skatina greitą bakterijų dauginimąsi kolboje inkubacija. Tačiau dažniausiai sultinyje bus daugiau nei vienos rūšies bakterijos. Norėdamas išskirti vieną bakteriją, mokslininkas paskleis nedidelį sultinio mėginį per pusiau kietą agaro plokštelę, naudodamas mikrobų metodą, vadinamą „dryžavimu“.
Agaro lėkštės
•••Comstock / Comstock / Getty Images
Agaro plokštelės yra pusiau skaidrūs, pusiau kieti geliai, susidedantys iš jūros dumblių ir specifinės maistinių medžiagų koncentracijos. Agaro naudingumas yra tas, kad jis suteikia lygų, minkštą paviršių augančioms bakterijoms. Kai mokslininkas ant agaro uždės vieną bakteriją, ji dauginsis padvigubindama tūkstančius kartų ir pasirodys kaip maža pavienių ląstelių kolonija.
Bakterijų dryžavimo įrankiai
•••Photos.com/Photos.com/Getty Images
Bakterijoms dryžuoti reikia trijų įrankių: agaro plokštelės, alkoholio degiklio ir vielos kilpos. Agaro plokštelė yra auginimo terpė, į kurią bakterijos perkeliamos užaugus sultinyje. Alkoholio degiklis yra maža alkoholio pripildyta lempa, skirta sterilizuoti vielos kilpą - ilga, plona rankena, kurios viename gale pritvirtinta nedidelė ugniai atsparios vielos kilpa. Perkėlus bakterijas iš sultinio į agaro plokštelę, kilpa laikys mažą lašelį bakterijų užpildyto sultinio.
Bakterijų dryžavimo procesas
•••„Hemera Technologies“ / Photos.com / „Getty Images“
Bakterijų išbraižymas ant agaro plokštelės yra paprastas, tačiau šį veiksmą turite atlikti teisingai, kitaip neišskirsite atskirų kolonijų. Įkaitinkite kilpą virš alkoholio degiklio, kad sterilizuotumėte vielą, tada pamerkite kilpos galiuką į sultinį. Keletą kartų per agaro plokštelės kilpą užmaukite kelis kartus pirmyn ir atgal. Dar kartą sterilizuokite kilpą ir supjaustykite skersai ir statmenai pirmiesiems dryžiams. Kelis kartus perkelkite kilpą pirmyn ir atgal per naują plokštės dalį. Sterilizuokite antgalį. vieną kartą lengvai perbraukite per paskutinę dryžuotą atkarpą ir kelis kartus judinkite kilpą pirmyn ir atgal. Brūkšnys atskiedžia pradinį sultinio lašą iki taško, kuriame paskutiniuose ruožuose bus atskiros kolonijos. Įdėkite plokštelę į inkubatorių arba ant stalviršio kambario temperatūroje ir palaukite kolonijų užaugs per naktį. Pavienės kolonijos paskutiniame ruože taps izoliuotomis vienos bakterijos kolonijomis.