Aukšto efektyvumo skysčių chromatografija (HPLC) yra laboratorinė technika, naudojama junginiams atskirti ir identifikuoti. Tai kolonėlių chromatografijos rūšis, kuri remiasi skirtingu junginių poliariškumu tirpale, kad juos atskirtų. HPLC skiriasi nuo standartinės kolonėlės chromatografijos, nes naudojant slėgį tirpalas greičiau išstumiamas per kolonėlę, todėl gaunami greitesni, o kartais ir tikslesni rezultatai. Tikslas yra atskirti junginius stulpelyje ir atskirai juos pašalinti.
Dėl HPLC greičio ir priklausomybės nuo skirtingų junginių poliškumo, du junginiai su panaši struktūra ir poliškumas gali išeiti iš chromatografijos aparato tuo pačiu metu arba beveik tas pats laikas. Tai vadinama koeliacija. Dėl suliejimo sunku tiksliai nustatyti, kuri mišinio dalis tuo metu išplaunama.
HPLC paprastai naudojama stiklinė kolona, užpildyta karoliukais, pagamintais iš skirtingų medžiagų. Mišiniai, verčiami per kolonėlę, turi chemikalų, kurie skirtingo stiprumo rišasi su granulėmis. Ryšio stiprumas, kuris priklauso nuo poliškumo panašumo, lemia, kiek laiko cheminė medžiaga prisijungs prie granulės, kol bus paleista. Kai kurie junginiai jungiasi taip stipriai, kad iš esmės niekada neišleidžiami iš kolonos karoliukų ir niekada nėra matuojami tirpale, išeinančiame iš kolonos.
Tipiniai laboratorinio atskyrimo metodai apima tyrimo ar atskyrimo metodo sukūrimą, o tada šio tyrimo įgyvendinimą atskiriems junginiams atskirti nuo tirpalo. Tačiau tai paprastai sukelia kelis sprendimus, kuriems taip pat reikia atlikti procedūras, o tai padidina eksponentinį sudėtingumą. Nors HPLC dažnai gali supaprastinti ir pagreitinti šį procesą, HPLC aparato kūrimo išlaidos gali tapti milžiniškos. Nors sukurti kur kas efektyvesnį HPLC aparatą, yra daug brangiau nei kurti kitus junginių atskyrimo tyrimus. Dėl to tai nėra finansiškai perspektyvi daugeliui mažų privačių laboratorijų.
HPLC naudojamas ne tik atskirti paprastus junginius, bet ir išskirti specifinius baltymus iš ląstelių mišinio. Šiuo atveju kolonos karoliukai paprastai yra padengti antikūnais, būdingais baltymui, kurį reikia surinkti. Baltymai suriša antikūnus, o likęs tirpalas praleidžiamas per kolonėlę, tada baltymai išleidžiami naudojant kitą tirpalą ir surenkami. Tam reikia aukštos kvalifikacijos techniko, kuris visą laiką stebėtų koloną ir įsitikintų, kad procesas vyksta tiksliai taip, kaip planuota.