세포보다 훨씬 작은 DNA 조각의 길이를 측정 할 때 미생물학자는 트릭이 필요하며 가장 편리한 방법은 겔 전기 영동입니다. 이 방법은 DNA 단편이 충전된다는 사실에 의존하며 더 비싼 방법의 대안입니다. 이중 나선 구조의 발견을 담당 한 X 선 결정학과 같은 방법 DNA의.
겔 전기 영동의 작동 원리
DNA 분자는 충전되기 때문에 전류의 영향을받습니다. 이들을 중성 겔에 놓고 겔에 전류를 가하면 분자가 양극 (양극)으로 이동합니다. 크기가 다른 DNA 분자는 동일한 전하를 전달하기 때문에 작은 분자가 더 빠르게 이동하므로이 과정은 분자를 알려진 크기의 샘플과 비교할 수있는 밴드로 분리합니다.
기본 전기 영동 절차
겔은 일반적으로 완충 용액에서 가열하면 반고체의 약간 다공성 겔을 형성하는 다당류 인 아가 로스로 만들어집니다. 한쪽 끝에서 겔은 연구자가 연구중인 DNA 샘플을 DNA 사다리라고하는 알려진 길이의 참조 샘플과 함께 배치하는 우물이라고하는 작은 홈을 형성합니다. 사다리 조각의 길이는 X 선 결정학과 같은 다른 방법으로 미리 결정되었습니다.
겔을 전도 용액에 담그고 전압을 가하면 조각이 젤을 통해 이동하기 시작합니다. 작은 것이 먼저이고 더 크고 느린 것이 뒤에 있습니다. 그들은 결국 크기에 따라 스펙트럼과 같은 밴드로 형성됩니다.
이것이 발생하면 연구원은 전원을 끄고 젤에 DVA 결합 염료를 주입하고 자외선 아래에서 표본을 검사합니다. 래더를 참조로 사용하여 연구원은 가시 밴드에있는 각 조각의 크기를 결정할 수 있습니다. 밴드 만 보입니다. 개별 DNA 조각은 너무 작아서 볼 수 없습니다.
알 수없는 조각의 길이 결정
샘플의 모든 밴드가 사다리의 밴드와 짝을 이루지 않을 가능성이 있으므로 이러한 알려지지 않은 조각의 크기를 결정하기 위해 과학자들은 일반적으로 그래프를 그립니다. x 축은 래더에서 각 밴드가 이동 한 거리 (밀리미터)이고, y 축은 각 밴드의 크기입니다. 점이 곡선으로 연결되면 해당 밴드가 이동 한 거리를 밀리미터 단위로 측정 한 후 모든 밴드의 크기를 곡선에서 외삽 할 수 있습니다.