რა არის HPLC- ის უარყოფითი მხარეები?

მაღალი ხარისხის თხევადი ქრომატოგრაფია (HPLC) არის ლაბორატორიული ტექნიკა, რომელიც გამოიყენება ნაერთების გამოყოფისა და იდენტიფიკაციისთვის. ეს არის სვეტის ქრომატოგრაფიის ტიპი, რომელიც ეყრდნობა ნაერთების სხვადასხვა პოლარობას ხსნარში, მათი გამოყოფის მიზნით. HPLC განსხვავდება სტანდარტული სვეტის ქრომატოგრაფიისგან, რადგან იგი იყენებს წნევას, რათა ხსნარი უფრო სწრაფად გაიზარდოს სვეტის გავლით და, შესაბამისად, იძლევა უფრო სწრაფ და ზოგჯერ უფრო ზუსტ შედეგებს. მიზანი არის სვეტში ნაერთების გამოყოფა და მათი ცალკე გასვლა.

HPLC სიჩქარის გამო და იგი ეყრდნობა ნაერთების სხვადასხვა პოლარობას, ორი ნაერთია მსგავსი სტრუქტურა და პოლარობა შეიძლება გამოვიდეს ქრომატოგრაფიული აპარატი ერთდროულად ან თითქმის ერთსა და იმავე დროს დრო ეს ცნობილია როგორც კოელუცია. Coelution ართულებს ზუსტად კონკრეტულად რომელი ნაწილის ნარევის გამორეცხვას რა ეტაპზე უჭირს.

HPLC ჩვეულებრივ იყენებს მინის სვეტს, რომელიც ივსება სხვადასხვა მასალისგან დამზადებული მძივებით. სვეტის საშუალებით იძულებითი ნარევები აქვს ქიმიკატებს, რომლებიც სხვადასხვა სიძლიერით უკავშირდება მძივებს. სავალდებულო სიმტკიცე, რომელიც დამოკიდებულია პოლარობის მსგავსებაზე, განსაზღვრავს რამდენ ხანს დაუკავშირდება ქიმიური ნივთიერება მძივს გამოყოფამდე. ზოგიერთი ნაერთი იმდენად ძლიერად იკვრება, რომ ისინი არსებითად არასდროს ათავისუფლებს სვეტის მძივებიდან და არასოდეს იზომება სვეტიდან გამოსულ ხსნარში.

ლაბორატორიული გამოყოფის ტიპიური ტექნიკა მოიცავს ანალიზის ან გამოყოფის მეთოდის შემუშავებას და შემდეგ ამ ანალიზის გამოყენებას ცალკეული ნაერთების გამოსაყოფად. ამასთან, ეს ჩვეულებრივ იწვევს მრავალგვარ ამონახსნს, რომლებსაც ასევე სჭირდებათ პროცედურების გავლა, რაც იწვევს სირთულის ექსპონენციალურ ზრდას. მიუხედავად იმისა, რომ HPLC– ს ხშირად შეუძლია ამ პროცესის გამარტივება და დაჩქარება, HPLC აპარატის განვითარების ღირებულება შეიძლება გახდეს უზარმაზარი. HPLC აპარატის განვითარება, მართალია ბევრად უფრო ეფექტურია, მაგრამ ბევრად უფრო ძვირია, ვიდრე ნაერთების გამოყოფის სხვა ანალიზების შემუშავება. ეს მას ფინანსურად არ გამოდგება მრავალი კერძო ლაბორატორიისთვის.

HPLC არა მხოლოდ უბრალო ნაერთების გამოყოფისთვის გამოიყენება, არამედ გამოიყენება კონკრეტული ცილების გამოყოფისთვის უჯრედული ნარევიდან. ამ შემთხვევაში, სვეტის მძივები ჩვეულებრივ დაფარულია ანტისხეულებით, სპეციფიკური ცილისთვის, რომლის შეგროვებაც გჭირდებათ. ცილები უკავშირებენ ანტისხეულებს და დარჩენილი ხსნარი გადადის სვეტში, შემდეგ ცილები გამოიყოფა სხვა ხსნარის გამოყენებით და გროვდება. ამისათვის საჭიროა მაღალკვალიფიციური ტექნიკოსის მუდმივად მონიტორინგი სვეტისთვის და დარწმუნდეთ, რომ პროცესი მიმდინარეობს ზუსტად ისე, როგორც დაგეგმილი იყო.

  • გაზიარება
instagram viewer