液体栄養ブロスは、大腸菌などの細菌の培養に使用されます。 このブロスのレシピは、細菌種や抗生物質耐性などの遺伝子組み換えの存在によって異なります。 寒天を加えることでブロスを固めることができます。これにより、細菌は明確なコロニーを形成できますが、液体培養では、単にボリューム全体に分散します。 これは、遺伝子クローニングや微生物学的アッセイなどの高度な方法にとって基本的ですが不可欠な手法です。 この記事では、標準的な実験用大腸菌株をルリアブロス（LB）寒天プレート（またはペトリ皿）で培養することを前提としています。
10グラムの細菌グレードのトリプトン、5グラムの酵母エキス、5グラムの塩化ナトリウム、15グラムの寒天またはアガロース、および1ミリリットルの1N水酸化ナトリウムを量り取ります。 1リットルの培地が得られるまで、これらを一定量の蒸留およびオートクレーブ滅菌水と混合します。 ゆるく蓋をしたボトルまたはフラスコに25分間培地をオートクレーブします。 抗生物質やその他の栄養補助食品など、高温で破壊される試薬を追加する前に、摂氏約50度まで冷ましてください。
オートクレーブにかけた培地を摂氏50度、摂氏45度以上に冷まします。寒天は、注ぐ前に容器にセットされます。 滅菌ペトリ皿を入手し、プレートの表面積全体とその深さの少なくとも半分を覆うのに十分な量を注ぎます。 プレートをいっぱいにしないでください。寒天が皿の上端に接触しないようにしてください。 蓋を外してフードの隅に置いて、プレートを無菌環境（層流フードの下など）で固化させます。
プレートを乾かします。 プレートはセットするとすぐに使用できますが、寒天の表面に水分が存在するため、細菌のコロニーが十分に付着するのを防ぎます。 したがって、バクテリアを適用する前にプレートを乾燥させるのが最善です。 層流フードの下または摂氏37度で数日間または30分間室温 インキュベータ。
プレートを保管します。 乾燥した皿は、ふたの上に逆さまに積み重ねて（裏返しにして）、元の状態に戻す必要があります 包装、テープで閉じ、光から保護するためにホイルで包むか、適切なものに包む コンテナ。 必ずプレートに準備日を記入し、プレートが2ヶ月以上経過している場合は使用を避けてください。
参考文献
- "分子生物学の現在のプロトコル"; カレン・エルビングとロジャー・ブレント。 2002
チップ
- 無菌環境内で（たとえば、 直火、または層流フード）は、空気中の細菌汚染物質が侵入して成長するのを防ぎます。 メディア。
著者について
Palmer Owyoungは、カリフォルニア大学サンディエゴ校で国際ビジネスの修士号を取得しています。 カリフォルニア大学サンタバーバラ校で社会学の学士号を取得し、分子の訓練を受けています。 生物学者。 彼は2006年からフリーランスのライターを務めています。 執筆に加えて、彼はフルタイムの外国為替トレーダーおよびインターネットマーケターです。
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