科学者や研究者は、実験室で培養物を準備することによって細菌の増殖を研究しています。 栄養寒天培地を含むペトリ皿は、1回のスワイプまたは接種から細菌培養物を増殖させます。 学生は、サイエンスフェアのプロジェクトのために、食料品店や健康食品店からの物資を使用して、自宅で栄養寒天培地を準備できます。 従来の厨房機器と基本的な台所用品は、ペトリ皿に分注できる滅菌培地を準備するためのツールを提供します。 材料を加熱し、表面を清潔で乾燥した状態に保つことによる滅菌技術に従うと、カビや粒子が培養物を汚染するのを防ぎ、結果を向上させます。
ストレーナーにコーヒーフィルターを置き、透明なボウルの開口部にストレーナーを掛けます。
ブロスをフィルターにゆっくりと注ぎ、ブロスがフィルターの側面から溢れないようにします。 フィルターが粒子で詰まった場合は、使用済みのフィルターを取り外し、きれいなフィルターと交換して、ブロスを注ぎ続けます。
ボウルの上部からストレーナーとフィルターを取り外し、ブロスが透明に見えるかどうかを観察します(つまり、液体に浮遊粒子がないかどうか)。 粒子が液体に浮かんでいる場合は、2番目の透明なボウルと新鮮なコーヒーフィルターを使用して、手順1と2を繰り返します。
鍋をストーブの上に置き、透明なスープを鍋に注ぎます。
スープが入っている鍋に16オンスの蒸留水を加えます。
ストーブの電源を入れ、中火から弱火に調整します。 スープを煮るまで加熱します(つまり、鍋の側面近くに小さな泡が現れます)。
小さじ1杯の寒天粉末を煮るブロス(約2.5グラム)に加え、粉末が溶けるまで混合物をかき混ぜます。 粉末をかき混ぜて溶かし、ゼラチンが鍋の底(燃える可能性がある場所)に沈まないようにしてください。
すべての寒天粉末がブロスに溶解するまで、ステップ7を繰り返します。
すべての粉末が完全に溶解することを確認するために約1分間ブロスを攪拌し続けます。
ストーブの電源を切り、鍋に蓋をして、液体を少なくとも15分間冷まします。
組み立てが簡単なように滅菌ペトリ皿を一列に並べますが、蓋は取り外さないでください。 必要に応じて、暖かい鍋を保持するためにトリベットを置きます。 ペトリ皿の代わりに蓋付きのカスタードカップを使用している場合は、カップと蓋を配置してカスタードカップを滅菌します ホイルで覆われたクッキーシートの上で逆さまに(逆さまに)、オーブンで375度で少なくとも1時間焼きます 華氏。 使用する前に、滅菌済みのカップと蓋が完全に冷却されていることを確認してください。
鍋の外側に注意深く触れて、触ると温かいことを確認し、鍋をトリベットの上に置きます。 ポットが熱すぎて触れられない場合は、ポットが冷えるまで少なくとも10分待ちます。
蓋を外して脇に置きます。 鍋にひしゃくを置きます。
1つのペトリ皿から蓋を外し、栄養ブロスをディスペンスして皿の半分を満たします。 すぐに皿をカバーで覆います。
ペトリ皿ごとに手順14を繰り返します。
栄養ブロスをペトリ皿で少なくとも1時間、邪魔されずに固化させます。
シャーレを左右に軽く振って、栄養ブロスが完全に固まったことを確認します。 ブロスが完全にゲル化していない場合は、さらに20分待ってから再度確認してください。
テーブルまたは平らな面をペーパータオルのロールで覆い、無菌の作業領域を作成します。 ペーパータオルをはがし、4回折りたたんで、厚い長方形の塊を作ります。 この札束を作業領域の一方の端に置きます。
1枚のペトリ皿を滅菌作業エリアに移し、蓋を外します。 皿を注意深く裏返し、片方の端を折りたたんだワッドの側面に置き、逆さにして少し角度を付けます(ペーパータオルのワッドにわずかな隙間があります)。
ふたを裏返し、滅菌作業面のペトリ皿の上に置きます。 ふたに水滴が出た場合は、ふたの内側に触れないように、ふたの表面に置く前にこの水分をそっと振り落としてください。
ペーパータオルの詰め物ではなく、前の皿の側に逆さにした皿の片側を配置して、各ペトリ皿に対して手順19と20を繰り返します。 皿は、余分な水分が蒸発するように片側に隙間があり、千鳥状のセットとして表示されます。
逆さにしたペトリ皿を見て、プレートの側面の水分が蒸発したかどうかを確認します。 すべての水分がなくなったら、プレートを裏返し、すぐに蓋をして使用します。
ふたで覆う前に、栄養寒天表面の目的の培養物を含む綿棒を拭いて、プレート上の普通寒天に接種します。 固形物が上になるようにペトリ皿を裏返します。 接種したペトリ皿は、培養用に固形物を上に、下に蓋をして水分、緩い粒子、または成長を捕らえるように保管します。
必要なもの
- コーヒーフィルター
- ストレーナー
- 2つの大きくて透明なボウル
- 16オンス 無脂肪ビーフブロス
- 16オンス 蒸留水
- ふた付き鍋
- ストーブ
- 10グラム寒天
- 計量スプーン
- スターラー
- ペーパータオルのロール
- 鍋つかみ
- 金属取鍋
- 滅菌ペトリ皿または蓋付きの透明なカスタードカップ
- オプション:タイマー、トリベット、オーブン、パン、アルミホイル、パン
チップ
蓋に過度の湿気が見られる場合は、華氏375度に設定されたオーブンで蓋を乾燥および滅菌します。 少なくとも1時間(アルミホイルで裏打ちされた清潔な鍋に蓋を置いてから、 オーブン)。
警告
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火傷をしないように鍋の取り扱いには注意してください。 鍋の側面が熱すぎると、鍋の中の液体が非常に熱くなります。 栄養ブロスは、皿に分配するために暖かくする必要がありますが、冷却および硬化中にペトリ皿に過度の結露を生じさせるには熱すぎないようにする必要があります。
培養物に不要な細菌が侵入しないように、ペトリ皿の内側(プレートや蓋など)に触れないでください。