あなたの先生はあなたにバクテリアのサンプルを渡し、あなたに尋ねます：このサンプルにはいくつの生存可能な微生物がありますか？ これはどういう意味ですか、そしてどのようにそれを理解しますか？ 1つの方法は、 コロニー形成単位（CFU）.
CFUとは何ですか？
CFUは、培地のプレート上で増殖する微生物の個々のコロニーの数を指します。 この値は、プレート上にコロニーを形成したときに複製できる細菌の数を表します。 サンプリングを含むCFU式があります。
どのようにCFUを見つけますか？
液体サンプル中の細菌の数を数えることは非常に困難です。 それらの数が多すぎて、小さすぎます。 さらに、それらのいくつかは死んでいて、他は生きているかもしれません、そして死んだものは合計に数えられるべきではありません。 あなただけに興味があります 実行可能 バクテリア、または複製できるバクテリア。 では、どのようにしてあなたが持っているバクテリアの数を知ることができますか？
1,000人の投票を取り、それを10,000人に適用して、特定の主題について彼らがどのように考えるかを理解するのと同じ方法です。 元のサンプルのごく一部を試して、バクテリアの数を把握することができます その部分を計算し、元の部分にいくつあったかを概算します サンプル。
希釈を使用してCFUを見つける
特定のサンプルのCFUを見つける手順には、最初にそのサンプルを希釈することが含まれます。 次に、希釈液を正しい増殖培地を含むプレートにプレーティングします。 元のサンプルは非常に濃縮されている可能性があるため、複数の希釈が適していることがよくあります。
一定時間プレート上でバクテリアを増殖させた後、 個々のコロニー プレート上で数えられます。 サンプルの濃度が高すぎると、個々のコロニーの代わりに、細菌の増殖で覆われた広い領域が表示されます。これは、 芝生. これは、個々のコロニーが見えるように、サンプルをさらに希釈して、もう一度成長を試みる必要があることを意味します。
個々のコロニーは、それ自体を何度も複製した単一の細菌に由来するため、これらのみがCFUにカウントされます。
CFUを見つけるための実験手順
希釈を使用してCFU計算を行う例は、次のようになります。まず、教師から提供された最初のサンプルから、1mLを採取してプレートします。 翌日、バクテリアの芝生があることがわかります。 これは、CFUの数を数えることができないことを意味します。 次のステップは、いくつかの希釈を行うことです。
まず、1 mLのサンプルを取り、それを9mLの液体培地に希釈します。 希釈はサンプル1部から希釈剤9部であるため、1：10希釈と呼ばれます。 次に、1：10希釈液1 mLを取り、それを9mLの液体培地に加えます。 この希釈は1：100希釈です。 最後に、1：100希釈液を1 mL取り、液体培地を9 mL加えることにより、1：1,000希釈液を作成します。 希釈ごとに、10mLの希釈細菌培養液が得られます。
希釈が完了したら、0.5mLの希釈液をプレートにプレートします。 希釈液をプレーティングしたプレートには必ずラベルを付けてください。
翌日戻ってきて、すべてのプレートにいくつかの個別のコロニーがあることを確認します。 あなたは間にプレートを選びたい 30および300コロニー. 1：1,000希釈プレートには約10個のコロニーがあることがわかります。これは、サンプルを過剰に希釈したことを意味します。 そのプレートは、CFUを見つけるのに役立ちません。
1:10希釈プレートには多くのコロニーがあり、おそらく300を超えます。 その場合、1：100プレートに行くことができます。 このプレートのコロニーを数えると、179個のコロニーがあることがわかります。 これは、1：100希釈液の0.5mLに179CFUが含まれていることを意味します。 しかし、元のサンプルはどうですか？
CFU計算とは何ですか？
いくつかのデータが得られたので、元のサンプルでCFU計算を実行できます。
1. メッキした量（0.5 mL）を取り、希釈係数（0.01）を掛けて0.005を求めます。 CFUカウントをもたらした希釈係数を見つけるには、これを行う必要があります。 ここでは、1：100希釈の0.5ミリリットルでCFUを数えることができました。
2. 希釈（179）からのCFUをステップ1（0.005）の結果で割ると、35,800CFUが得られます。
これは、希釈された元の1mLのサンプルに35,800CFUが含まれていることを意味します。 別の言い方をすれば、元のサンプルのCFU / mLは35,800CFU / mLであると言えます。
CFUは、特定のサンプルに含まれる細菌、真菌、または微生物の数を見つけるための優れたツールです。 ここで説明するプレーティング方法は、液体培養ではうまく成長しない非常に濃縮されたサンプルや生物に特に役立ちます。