緩衝液は、H +およびOH-イオンを中和する弱酸塩基コンジュゲートを含んでいるため、pHの変化に抵抗します。 緩衝液は、弱酸または弱塩基とその酸または塩基の塩で構成されています。 適切な緩衝液システムの選択は、緩衝液のpH範囲によって異なります。 ほとんどの生物学的反応は、6〜8のpH範囲で発生します。 リン酸塩緩衝液は、6.5〜7.5のpH範囲で緩衝します。 カルボン酸緩衝液は、pH 3〜6で有用です。 ホウ酸緩衝液はpH8.5から10まで機能します。 グリシンやヒスチジンなどのアミノ酸緩衝液は、さまざまなpH範囲で機能します。 トリス緩衝液は、生物学研究室で最も一般的に使用されている緩衝液システムの1つです。 次の例では、Tris緩衝液の計算を使用しますが、この方法はすべての緩衝液に適用されます。
最終溶液のモル濃度と体積の積を使用して、必要な塩基のモル数を決定します。 たとえば、2リットルの0.1 M Trisバッファー溶液が必要な場合、必要なTrisのモル数は次のようになります。
必要なモル数に塩基の分子量を掛けて、必要なバッファーの質量を計算します。 たとえば、0.2モルのトリス塩基の質量は次のようになります。
マグネチックスターラーと攪拌ホットプレートを使用して、ベースを蒸留水に溶解します。 最終溶液の量よりわずかに少ない量の水に溶解します（最終溶液1リットルあたり950〜975 mL）。 トリス緩衝液のpHは濃度によって変化し、使用する初期容量が小さすぎる場合は再調整が必要です。 TrisはpHに大きな温度依存性の変化があるため、アッセイまたは実験中に使用するのと同じ温度でバッファーを調製することも最適です。
チップ
- 緩衝液を調製する際の時間を節約するために、必要なpHで事前に作成された緩衝液濃縮液を使用し、必要なモル濃度と容量に希釈することができます。 大きなpH変化を避けるために使用されるのと同じ温度で緩衝液を準備します。 時間のかかるpH調整を避け、目的の濃度に希釈した後にのみ滴定します。 少量に溶解すると、滴定が繰り返されます。
警告
- 酸と塩基の取り扱いには注意してください。 保護メガネを着用してください。
著者について
Carla Boulianneは、トレーニングによる進化生物学者であり、情熱によるフリーランスのライターです。 Demand StudiosとeHowの執筆に加えて、彼女はSuite101.comのParenting a GiftedChildのフィーチャーライターでもあります。 彼女は広範な研究を通じて新しいトピックを探求することにワクワクしています。
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