חישוב טיטר לנגיף הוא דרך מסובכת לומר כי מדען סופר את מספר הנגיפים במדגם מסוים. כדי לחשב כותרות נגיפים, מדענים מדביקים צלחות של חיידקים מגדלים בתמיסות נגיפיות בריכוזים שונים להבין את מספר הנגיפים בתמיסה המקורית על ידי ספירת החיידקים שמתו עקב הנגיף הַדבָּקָה.
לבש כפפות, מלא 10 צינורות תרבית עם 9 מ"ל מרק ותייג אותם "10 ^ -1", "10 ^ -2", "10 ^ -3", ו כך עד "10 ^ -10". צינורות אלה ישמשו לדילולים סדרתיים נגיפיים המשמשים לחישוב הפאגים כייל. מכיוון שנגיפים יכולים לגדול לריכוזים גבוהים להפליא, עליך לדלל אותם על מנת לספור אותם ביעילות. כל שפופרת מייצגת דילול פי עשרה של הנגיף.
קח 1 מ"ל מהתרבות המעורבת מהצינור שלך שכותרתו "10 ^ -1" והעביר אותו עם פיפטה חדשה לצינור הבא, שכותרתו "10 ^ -2". מערבבים גם את הצינור הזה.
המשך בתבנית זו כדי ליצור סדרת דילול סדרתי. בסופו של דבר תקבלו 9 צינורות של 9 מ"ל וצינור אחד של 10 מ"ל. העומסים הנגיפיים בצינורות שלך ידוללו בין פי 10 (הצינור הראשון שלך) או פי 100 (הצינור השני שלך) לעשר מיליארד פעמים (הצינור הסופי שלך).
הוסיפו שתי טיפות של תרבית חיידקים לאגר שלכם וערבבו בעדינות. אלה החיידקים שייהרגו, ומאפשרים לך לספור את מספר חלקיקי הנגיף בתמיסה מסוימת.
הוסף 1 מיליליטר של כל דילול סדרתי לצינור האגר המתאים לו בזמן שהצינורות עדיין באמבט המים החמים. לדוגמה, 1 מ"ל של הדילול הסידורי 10 ^ -1 שלך צריך להיכנס לצינור האגר שכותרתו "10 ^ -1."
מערבבים כל שפופרת ואז יוצקים כל שפופרת לצלחת הפטרי עם התווית המתאימה. זה ייצור שכבה דקה של אגר שחוסנה בחיידקים ווירוסים בכל צלחת. תן לצלחות לגדול בן לילה בחממה.
הוצא את הצלחות שלך מהחממה ובדוק אותן. אתה צריך לראות אזורים מעוננים ברחבי הצלחת שבהם גדלו חיידקים, למעט כתמים ברורים קטנים הנקראים פלאקים. לוחות אלה הם כתמי חיידקים מתים, וכל פלאק מייצג נגיף אחד.
קח את מספר הלוחות בצלחת שלך והכפל ב -10. אם ספרת 157 לוחות, היית מקבל 1570.
הכפל את המספר שקיבלת בשלב הקודם בהפוך המספר בצינור הדילול שלך. לדוגמה, אם הלוח שבחרת היה הלוח 10 ^ -5, היית מכפיל את 1570 ב -10 ^ 5 כדי לקבל 157000000. המספר הסופי הזה הוא כייל הפאג שלך, ומייצג את מספר הנגיפים למ"ל של התרבות המקורית שלך.