Sebbene non possano essere visti ad occhio nudo, i batteri sono ovunque. Esistono nel cibo, nel suolo, nell'acqua, nelle superfici delle nostre case e dentro e sui nostri corpi. I batteri generalmente esistono in popolazioni miste. L'isolamento di un batterio specifico da altre specie batteriche in un dato campione consente ai microbiologi di studiarne la struttura e la funzione, caratteristiche utilizzate nella sua identificazione. I microbiologi isolano spesso i batteri utilizzando una delle diverse tecniche di piastra a strisce.
Utensili
Un ciclo di inoculazione viene utilizzato per trasferire i microrganismi. È costituito da un filo di nichelcromo o platino con un piccolo anello circolare su un'estremità. L'altra estremità è dritta e scorre in una maniglia. Sono disponibili anche anse per inoculazione in plastica monouso. I batteri possono essere isolati solo se crescono. I microbiologi coltivano batteri per l'isolamento delle piastre a strisce in piastre di Petri rotonde e poco profonde riempite con un mezzo solido, chiamato agar. Agar imita l'ambiente in cui i batteri crescono naturalmente. I piatti pieni di terreno sono sterili e dotati di coperchio per prevenire la crescita di organismi indesiderati. Durante l'isolamento della piastra a strisce, l'ansa di inoculazione viene ripetutamente sterilizzata alla fiamma di un becco Bunsen.
Principio
La tecnica della piastra a striscio è il metodo più diffuso per isolare batteri specifici da un campione contenente una miscela di microrganismi. La tecnica essenzialmente diluisce il numero di organismi e riduce la loro densità. Consente ai microbiologi di distinguere e isolare le singole colonie batteriche. Una colonia è un gruppo visibile di batteri. Tutti i batteri di una singola colonia provengono dalla stessa cellula batterica. Di conseguenza, le singole colonie sono colonie "pure". La colonia pura viene trasferita su un'altra piastra per produrre una coltura pura costituita da un tipo di batteri.
Procedura
Se eseguito correttamente, l'isolamento della piastra a strisce assottiglia un campione e consente alle singole cellule batteriche di svilupparsi in colonie isolate. Un microbiologo inizia sterilizzando l'ansa di inoculazione in una fiamma. Raffredda l'ansa toccandola sull'agar, quindi immerge l'ansa nel campione e la stende avanti e indietro per coprire una sezione della piastra. Sterilizza l'ansa, la raffredda e inocula una seconda sezione adiacente della piastra trascinandola il ciclo attraverso la prima sezione più volte e coprendo la seconda sezione usando uno zigzag movimento. Questo raccoglie un piccolo numero di batteri dalla prima sezione e li trasferisce alla seconda sezione. Il numero di volte in cui viene ripetuta questa procedura di base dipende dal metodo della piastra a strisce utilizzato. Nonostante il metodo, il campione originale viene utilizzato per inoculare solo la prima sezione della piastra.
Metodo della piastra a strisce
I metodi della piastra con strisce variano in base al numero di sezioni di agar strisciate. Il metodo T-streak utilizza tre sezioni: la metà superiore e due sezioni inferiori di uguali dimensioni. L'inoculo iniziale è posto nella metà superiore della piastra. I batteri vengono trascinati dalla sezione superiore a una delle sezioni inferiori, quindi da quella sezione inferiore all'altra. Nel metodo del quadrante, vengono striate quattro sezioni di dimensioni uguali. Il metodo di striatura continua in genere prevede l'inoculazione della metà superiore della piastra, ruotandola di 180 gradi, e inoculando l'altra metà della piastra senza sterilizzare l'ansa o trascinare i batteri dalla precedente sezione.