Alasan utama Anda menodai spesimen sebelum meletakkannya di bawah mikroskop adalah untuk melihatnya dengan lebih baik, tetapi pewarnaan lebih dari sekadar menyoroti garis besar sel. Beberapa noda dapat menembus dinding sel dan menyoroti komponen sel, dan ini dapat membantu para ilmuwan memvisualisasikan proses metabolisme. Noda juga membantu membedakan antara sel hidup dan sel mati. Selain itu, pewarnaan memungkinkan para ilmuwan menghitung jumlah sel dari jenis tertentu dalam biomassa tertentu. Ada dua puluh atau lebih jenis noda yang berbeda, dan masing-masing memiliki tujuannya.
TL; DR (Terlalu Panjang; Tidak Membaca)
Tujuan utama pewarnaan adalah untuk menonjolkan sel dan bagian sel. Lebih dari 20 jenis noda ada, dan jenis noda yang Anda gunakan tergantung pada apa yang Anda cari.
Jenis Noda
Pilihan noda tergantung pada apa yang Anda cari. Tidak semua noda cocok untuk sel hidup, tetapi yang termasuk coklat Bismarck, merah toluena, biru Nil dan merah Nil, dan fluoresen tertentu yang digunakan untuk menyoroti DNA. Beberapa noda menyoroti spora, beberapa mendeteksi lipid dan protein, dan beberapa berubah warna dengan adanya pati. Tujuan pemeriksaan menentukan jenis noda yang terbaik untuk digunakan. Misalnya, seorang praktisi medis yang melakukan PAP smear akan menggunakan Eosin Y. Ini adalah pewarna fluorescent asam yang berubah menjadi merah ketika kontak dengan sel darah merah, sitoplasma dan membran sel. Ini juga digunakan untuk menguji sumsum darah.
Dalam beberapa kasus, penyidik dapat menggunakan lebih dari satu noda. Misalnya, hematoxylin adalah noda yang mengubah inti sel menjadi biru. Ketika digunakan bersama dengan eosin, yang mengubah bagian lain dari sel menjadi merah atau merah muda, ini memberikan kontras yang lebih kuat dan membuat inti lebih mudah untuk dibedakan. PAP smear dan sampel sumsum darah lebih mudah diperiksa bila kedua noda ini digunakan bersama-sama.
noda gram: Pekerja rumah sakit menggunakan pewarnaan Gram untuk mengidentifikasi bakteri berbahaya. Ini sebenarnya adalah serangkaian pewarna yang memiliki efek berbeda pada berbagai jenis bakteri dan memberi dokter alat diagnostik yang penting. Pewarnaan Gram adalah proses tiga bagian. Yang pertama, kristal violet Hucker ditambahkan, yang menodai semua bakteri dengan warna ungu yang seragam. Pada tahap selanjutnya ditambahkan pewarna yodium, yang menyebabkan warna melekat pada sel Gram positif, terutama Staphylococcus dan Streptococcus. Noda dibersihkan, meninggalkan sel Gram-positif dengan warna ungu yang berbeda; kemudian pewarna ketiga, Safranine O, dimasukkan untuk meningkatkan kontras antara bakteri Gram-negatif dan sisa bahan dalam slide.
Prosedur pewarnaan
Saat menyiapkan spesimen pada slide, Anda dapat memasangnya secara kering atau basah, Anda dapat mengirisnya menjadi bagian yang tipis atau Anda dapat mengoleskannya. Saat menggunakan pewarnaan, prosedur yang biasa dilakukan adalah membasahi spesimen, yang berarti menempatkan setetes air pada slide, memasukkan spesimen ke dalam air dan menutupinya dengan kaca penutup. Anda kemudian menerapkan noda ke sudut slide dengan penetes dan membiarkannya ditarik ke arah spesimen dengan aksi kapiler. Ini membantu untuk meletakkan handuk kertas di sisi berlawanan dari slide untuk menarik air. Setelah noda menyebar ke seluruh slide, spesimen siap untuk diperiksa.