Cara Mengidentifikasi Enterobacter Aerogenes API 20E

Enterobacter aerogenes dan spesies Enterobacteriaceae lainnya mudah diidentifikasi menggunakan alat uji API-20E. Kit ini, diproduksi oleh bioMeriuex Inc., mencakup 20 tabung mini atau sumur untuk pengujian. Pengujian terdiri dari menginokulasikan suspensi bakteri murni ke dalam sumur uji dan membaca reaksi warna yang terjadi. Identifikasi bergantung pada konversi hasil reaksi warna ini menjadi kode tujuh digit yang dikenal sebagai Indeks Profil Analitis. Mencocokkan kode ini dengan database pabrikan memberikan identifikasi organisme.

Buka ampul yang berisi 5 ml natrium klorida 0,85 persen medium. Keluarkan satu koloni dari pelat isolasi berusia 18 hingga 24 jam dengan pipet, dan tambahkan ke dalam ampul. Campur untuk mendapatkan suspensi yang homogen. Gunakan suspensi ini segera setelah Anda selesai mempersiapkannya.

Siapkan kotak inkubasi yang terdiri dari sumur sarang lebah di nampan yang dilengkapi dengan penutup. Buka kotak, dan tambahkan 5 ml air demineralisasi atau air suling ke dalam sumur baki. Buka kemasan strip yang disediakan dalam kit uji API 20E, dan masukkan ke dalam kotak inkubasi.

Isi tabung dan cupule sumur bertanda "GEL," "VP" dan "CIT" dengan suspensi yang telah Anda siapkan. Di sumur yang tersisa, isikan suspensi bakteri ke dalam tabung tetapi bukan cupule. Tambahkan minyak mineral ke dalam sumur bertanda "ADH," "ODC," "LDC," "URE" dan "H2S" untuk menciptakan lingkungan anaerobik.

Tutup kotak inkubasi dengan penutup, dan inkubasi pada suhu antara 34 dan 38 derajat Celcius selama 18 hingga 24 jam.

Amati sumur, dan catat reaksi pada lembar hasil. Asalkan minimal tiga tes positif, lanjutkan ke reaksi warna menggunakan larutan uji kimia, atau reagen, yang disertakan dengan kit. Tambahkan satu tetes reagen TDA ke dalam "TDA" yang ditandai dengan baik dan teteskan masing-masing reagen VP1 dan VP2 ke dalam yang ditandai dengan baik "VP." Jika kurang dari tiga tes keluar positif, inkubasi strip selama 24 jam sebelum menambahkan ini reagen.

Amati perubahan warna yang dihasilkan dalam sumur. Warna coklat kemerahan pada TDA menunjukkan reaksi positif. Tunggu 10 menit setelah menambahkan reagen dari kit ke VP1 dan VP2. Pertimbangkan warna merah atau merah muda sebagai positif dan warna merah muda pucat yang muncul setelah 10 menit sebagai negatif.

Lakukan tes oksidase seperti yang ditentukan oleh pabrikan kit, dan catat hasilnya bersama dengan hasil 20 tes sebelumnya.

Masukkan nomor profil tujuh digit ini ke dalam basis data pabrikan kit melalui telepon nada sentuh. Tunggu untuk menerima identifikasi yang disediakan oleh database. Jika nomor profil tidak memberikan hasil yang spesifik, lakukan pengujian tambahan yang ditentukan oleh produsen kit.

  • Bagikan
instagram viewer