HPLC menawarkan metode yang cepat, otomatis, dan sangat akurat untuk mengidentifikasi komponen kimia tertentu dalam sampel, tetapi metode ini bisa mahal, rumit, dan tidak berfungsi untuk semua sampel. Laboratorium medis, forensik, lingkungan, dan manufaktur menggunakan teknik ini untuk mengukur dan memisahkan bahan kimia dalam sampel. HPLC memiliki kelebihan dan kekurangan dibandingkan dengan teknik lainnya.
HPLC dan Teknik Serupa
Seperti bentuk kromatografi lainnya, HPLC memungkinkan pemisahan konstituen kimia melalui penggunaan fase gerak dan fase diam. Fasa geraknya cair dan fasa diamnya padat. Karena komponen yang berbeda bergerak pada kecepatan yang berbeda mereka terpisah satu sama lain. Teknik alternatif termasuk elektroforesis kapiler, di mana zat bermigrasi melalui larutan dalam aliran listrik lapangan, dan metode kromatografi lainnya seperti ekstraksi fase padat, kromatografi gas dan lapisan tipis kromatografi.
Kecepatan, Efisiensi, dan Akurasi
Dibandingkan dengan teknik kromatografi lainnya, seperti KLT, HPLC sangat cepat dan efisien. Ini menggunakan pompa, bukan gravitasi, untuk memaksa pelarut cair melalui bahan penyerap padat, dengan komponen kimia yang berbeda memisahkan saat mereka bergerak pada kecepatan yang berbeda. Proses ini dapat diselesaikan dalam waktu sekitar 10 hingga 30 menit, dan memberikan resolusi tinggi. Ini akurat dan sangat dapat direproduksi. Karena sebagian besar otomatis, pengoperasian HPLC dasar dapat dilakukan dengan pelatihan minimal.
Biaya dan Kompleksitas
Terlepas dari kelebihannya, HPLC bisa mahal, membutuhkan bahan organik mahal dalam jumlah besar. Teknik seperti ekstraksi fase padat dan elektroforesis kapiler bisa lebih murah dan bahkan lebih cepat, terutama untuk analisis di bawah praktik manufaktur yang baik. Meskipun relatif mudah untuk menggunakan metode HPLC yang ada, dapat menjadi rumit untuk memecahkan masalah atau mengembangkan metode baru. Ini sebagian besar karena susunan modul, kolom, dan fase gerak yang berbeda.
Sensitivitas dan Resolusi
Secara umum, HPLC serbaguna dan sangat tepat dalam hal mengidentifikasi dan mengukur komponen kimia. Dengan banyak langkah yang terlibat, ketepatan HPLC sebagian besar tergantung pada proses yang otomatis dan karena itu sangat dapat direproduksi. HPLC memang memiliki sensitivitas rendah untuk senyawa tertentu, dan beberapa tidak dapat dideteksi karena teradsorpsi secara ireversibel. Zat yang mudah menguap lebih baik dipisahkan dengan kromatografi gas.
