Plot grafik konsentrasi produk versus waktu untuk data dari tabung reaksi pertama uji enzimatik. Catatan: sumbu horizontal harus "waktu", dan sumbu vertikal harus "konsentrasi produk".
Hitung garis regresi linier untuk titik data yang Anda plot di Bagian 1, Langkah 1. Meskipun kalkulator Excel dan grafik dapat dengan mudah menentukan model linier ini, Anda dapat memperoleh perkiraan regresi kemiringan garis dengan membagi perbedaan konsentrasi produk antara titik data yang berdekatan dengan perbedaan waktu.
Catat kemiringan garis regresi linier dari Bagian 1, Langkah 2 sebagai "kecepatan reaksi awal (Vo)." Catatan: dalam model garis regresi "[konsentrasi produk] = m [waktu] + b", koefisien "m" adalah lereng.
Ulangi Langkah 1, 2 dan 3 untuk sisa tabung reaksi dalam pengujian.
Plot kebalikan dari konsentrasi substrat untuk setiap tabung reaksi versus kebalikan dari kecepatan reaksi awalnya (dari Bagian 1, Langkah 4). Misalnya, jika kecepatan awal untuk tabung reaksi dengan konsentrasi substrat awal 50 mikromolar (uM) adalah 80 uM/s, kebalikannya adalah 1/50 uM untuk konsentrasi substrat dan 1/80 uM/s untuk konsentrasi awal kecepatan. Catatan: konsentrasi substrat terbalik harus pada sumbu horizontal, dan kecepatan awal terbalik harus pada sumbu vertikal.
Catatan: konsentrasi substrat harus pada sumbu horizontal, dan kecepatan reaksi awal harus pada sumbu vertikal.
Tentukan garis regresi linier untuk bagan yang Anda gambarkan di Bagian 2, Langkah 1. Catatan: karena Anda perlu mengetahui perpotongan y untuk garis regresi, Anda harus memasukkan poin dari Bagian 2, Langkah 1 ke dalam Excel atau kalkulator grafik dan gunakan pemodelan regresi bawaan Kegunaan.
Bagilah 1 dengan perpotongan y dari garis regresi linier. Ini akan memberi Anda nilai kebalikan dari Vmax, kecepatan reaksi maksimum untuk enzim. Catatan: jika model regresi linier berbentuk "[Vo Terbalik] = m [Konk. Substrat Terbalik] + b", maka nilai "b" adalah perpotongan y. Bagilah 1 dengan "b" untuk menghitung kebalikan dari Vmax.
Bagi 1 dengan hasil dari Bagian 2, Langkah 3 untuk menghitung nilai sebenarnya dari Vmax.
Tentukan konsentrasi enzim dalam uji asli (lihat data mentah). Catatan: konsentrasi enzim sama untuk semua tabung reaksi; hanya konsentrasi substrat yang bervariasi dalam pengujian.
Bagilah Vmax (dari Bagian 2, Langkah 4) dengan konsentrasi enzim (dari Bagian 2, Langkah 5). Hasilnya adalah nilai Kcat.
Seorang copywriter yang berbasis di Chicago, Andy Pasquesi memiliki pengalaman yang luas dalam menulis untuk otomotif (BMW, MINI Cooper, Harley-Davidson), jasa keuangan (Ivy Funds, William Blair, T. Rowe Price, CME Group), klien perawatan kesehatan (Abbott) dan barang konsumsi (Sony, Motorola, Knoll). Dia memegang gelar Bachelor of Arts dalam bahasa Inggris dari Universitas Harvard tetapi tidak peduli dengan koma Oxford.