A fő ok, amiért megfest egy mintát, mielőtt a mikroszkóp alá helyezi, az, hogy jobban szemügyre vegye, de a festés sokkal több, mint egyszerűen a sejtek körvonalainak kiemelése. Egyes foltok behatolhatnak a sejtfalakba, és kiemelhetik a sejtkomponenseket, és ez segíthet a tudósoknak az anyagcsere folyamatok vizualizálásában. A foltok segítenek megkülönböztetni az élő sejteket az elhalt sejtektől. Ezenkívül a festés lehetővé teszi a tudósok számára, hogy megszámolják egy adott típusú sejtek számát egy bizonyos biomasszán belül. Húsz vagy több különböző folt létezik, és mindegyiknek megvan a maga célja.
TL; DR (túl hosszú; Nem olvastam)
A festés fő célja a sejtek és sejtrészek kiemelése. Több mint 20 folt létezik, és a folt típusa attól függ, hogy mit keres.
A foltok típusai
A folt kiválasztása attól függ, hogy mit keres. Nem minden folt alkalmas élő sejtekre, de azok, amelyek közé tartozik a Bismarck barna, a toluolvörös, a níluskék és a nílusi vörös, valamint a DNS kiemelésére használt bizonyos fluoreszcensek. Egyes foltok kiemelik a spórákat, mások lipideket és fehérjéket detektálnak, mások pedig keményítő jelenlétében megváltoztatják a színüket. A vizsgálat célja meghatározza a legjobb foltfajtát. Például egy PAP-kenetet végző orvos az Eosin Y-t használja. Ez egy savas fluoreszcens festék, amely vörösessé válik, amikor érintkezik a vörösvérsejtekkel, a citoplazmával és a sejtmembránokkal. Vérvizsgálatra is használják.
Bizonyos esetekben a nyomozó több foltot is használhat. Például a hematoxilin egy olyan folt, amely a sejtmagokat kékre váltja. Az eozinnal együtt alkalmazva, amely a sejt többi részét pirosra vagy rózsaszínre változtatja, erősebb kontrasztot biztosít és megkönnyíti a magok megkülönböztetését. A PAP keneteket és a vérvelő mintákat könnyebb megvizsgálni, ha ezt a két foltot együtt használják.
Gram foltja: A kórház dolgozói Gram-foltot használnak a káros baktériumok azonosítására. Ez valójában egy színezőanyagok sorozata, amelyek különböző hatással vannak a különböző típusú baktériumokra, és fontos diagnosztikai eszközt adnak az orvosoknak. Gram foltja háromrészes folyamat. Az elsőbe Hucker kristály ibolyáját adják, amely minden baktériumot egyenlet ibolya színűre fest. A következő szakaszban jódfoltot adnak hozzá, amelynek hatására a szín tapad a Gram-pozitív sejtekre, amelyek elsősorban Staphylococcus és Streptococcus. A foltot lemossák, így a Gram-pozitív sejtek világos ibolyaszínűek; majd egy harmadik foltot, a Safranine O-t vezetünk be, hogy fokozzuk a kontrasztot a Gram-negatív baktériumok és a tárgylemezen lévő többi anyag között.
Festési eljárás
Ha a tárgylemezen egy mintát készít, akkor szárazon vagy nedvesen felszerelheti, szeletelheti vékony részre, vagy bekenheti. Folt használata esetén a szokásos eljárás a minta nedves felszerelése, ami azt jelenti, hogy egy csepp vizet helyezzen a tárgylemezre, helyezze a mintát a vízbe, és fedje le egy fedéllel. Ezután a foltot egy csepegtetővel a tárgylemez egyik sarkára alkalmazza, és lehetővé teszi, hogy kapilláris hatással a minta felé húzódjon. Segít egy papírtörlőt a csúszda másik oldalára tenni, hogy vonzza a vizet. Miután a folt eloszlott az egész tárgylemezen, a minta készen áll a vizsgálatra.